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Cy7-Dibenzylcyclooctyne,CY7标记二苄基环辛炔的合成路线
发布时间:2025-09-03     作者:axc   分享到:
Cy7-Dibenzylcyclooctyne,CY7符号二苄基环辛炔的组成途径

Cy7-DBCO为近红外荧光素(Cyanine7 类)与二苄基环辛炔(DBCO, 常写作 dibenzocyclooctyne)通过稳定酰胺键或聚乙二醇(PEG)桥连接的共轭分子。Cy7 提供 740–770 nm 吸收、约 770–800 nm 发射,适合体内/深层成像与共聚焦观察;DBCO 则是铜自由点击(SPAAC)反应的典型环炔基,可与叠氮基(azide)在温和条件下高选择性地耦合,用作后续生物正交标记。将两者结合得到的 Cy7-DBCO 既保留了 NIR 发光特性,又赋予分子与叠氮化物配体的“可点火”功能,适用于标记叠氮化修饰的蛋白、寡核苷酸、糖类或材料表面以实现荧光示踪与后续点对点偶联。分子设计中常加入短 PEG 链(PEG2–PEG8)以提高水溶性、降低疏水聚集和减少非特异性结合。典型目标物理性质:分子量 900–2000 Da(视 PEG 长度与 Cy7 衍生物而定),紫外-可见/荧光光谱和 RP-HPLC 保留时间为主要表征指标。

制作而成线路(推送线路 A:合理常用;并拿出线路 B:如要自制作而成 DBCO 的概览)规划 A(推介,系统设计现做模块生化试剂) — Cy7-NHS 与 DBCO-PEG_n-NH2 偶联采血管与溶液:Cy7-NHS (或 Cy7-succinimidyl ester,1.05 eq),DBCO-PEG4-NH2(或 DBCO-PEG2/PEG8-NH2,1.0 eq),无水 DMF 或 DMSO,碳酸氢盐缓冲区或微量分析生物碳胺(酸碱度必备条件),N2 惰性课堂气氛,阴凉操控。消融:在干燥处理、遮光情况下,分开将 Cy7-NHS 易溶几瓶无水 DMF,将 DBCO-PEG-NH2 易溶 DMF/0.1 M 碳酸氢盐响应(pH 8.3)混合着水溶液,确保综合无机相不已超 30–40%。偶联的表现:将 Cy7-NHS 悬浊液在 0–25 °C 下较慢成为 DBCO-悬浊液,混和 1–3 h(环境的温度常满足),用 TLC 或 了解 HPLC 监控设备的表现(Cy7 消化吸收峰处的峰消长)。如需要速,可将的温度能维持在 30 °C 接下来尽可能的防止发动机组升温颜料化学降解。中止与操作:响应成功后加入到咖啡因中毒甘氨酸或无水乙醇胺(≈5 eq)淬灭多余 NHS 酯,就稀释后以去阳离子水/乙腈为还是流动性相参与半准备 C18 RP-HPLC(梯度方向 5→70% 乙腈 + 0.1% TFA),拆分主结果。纯化与低温干燥:汇集主峰、冻干得以 Cy7-DBCO(一般说来得率 40–75%,但关键在于于启始物与实际操作)。定性分析:HR-ESI-MS(明确大分子量)、^1H NMR(若试样溶液浓度允许的)、UV-Vis(见证 λ_max)、荧光光谱图、RP-HPLC(溶解度)与 DLS(检侧聚合)。储存室:全自动灌装机于棕红色安瓿,-20 °C 微冻低温干燥另存;悬浊液态 4 °C 阴凉短期的另存。不要强光直接、烧碱溶液/酸性及长远巧妙高沸点溶剂中另存避免活性染料裂解。路线地图 B(如要自合出 DBCO 骨架) — 概览获得 dibenzocyclooctyne 骨架往往从二苯甲基被淘汰的环辛烯前体逐渐开始,涉及到芳基添加、立体式有机化学调节与脱氢/环化步奏;分类途径收录从某些二苯基环辛烷前体脱氢或采用金属材料达成的环化来勾勒八元环的力值环炔模式。合成视频的 DBCO 进那步经羧酸/氨基能力化(举例说明传入短 PEG 链并末梢整修为胺或羧),以便之后与 Cy7-NHS 或带羧基的 Cy7 根据 EDC/NHS 或碱化酯偶联。该行车的路线有关多步无机分解、按照严格的无水/惰性课堂气氛运作与偶联中间的体的色谱破乳,任务量与风险点有明显过于行车的路线 A,大多数仅在商业性的采血管不能得或需层次性加入基时用于。特别留意问题与质调控有机染料与 DBCO 都对光、热明感:单趟闭光、最好低温环境操作步骤。把控好标签度(1:1 为优)以减掉多被淘汰造成 的光学薄膜淬灭。用 RP-HPLC 认证单独峰与高纯净度;用 HRMS 认证精准度大分子量。对其进行水相偶联前,分析容解性并选择 PEG 链厚度对水无水磷酸氢与不起作用数率的应响。

产品名称:Cy7-Dibenzylcyclooctyne,CY7标记图片二苄基环辛炔

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Cy7-Dibenzylcyclooctyne

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