HSA-PEG-DMG,人血清白蛋白-聚乙二醇-二肉豆蔻酰-sn-甘油的合成方法
物料种类:HSA-PEG-DMG,人血清廉蛋白酶-聚乙二醇-二肉肉豆蔻酰-sn-甘油的分解成步骤结合措施阐述DMG-PEG的制作:酯键连接方式:将DMG-sn-甘油的3-羟基与甲氧基PEG(mPEG)的羧基端(采用蜜腊酸酐呈现构建)在EDC/NHS活性下缩合。生理反应标准:pH 7.4,空调温度作用12-24每小时,产出率>80%。醚键无线连接:使用威廉姆森合并法,将DMG的3-羟基被转化为溴代物,与PEG的羟基端在是碱性的先决条件下(如K₂CO₃/DMF)响应。HSA-PEG-DMG的偶联:方案一:共价绘制:将DMG-PEG的尾端羧基与HSA的赖氨酸残基(ε-氨基)能够 EDC/NHS纯化缩合。主要参数指标:HSA:DMG-PEG摩尔比=1:10,pH 8.0,4°C响应24半小时,装饰度达5-7个PEG/HSA。策略二:非共价自組裝:运用HSA的疏水切合位点,马上混杂HSA与DMG-PEG,确认疏水双方功能建成软型物。强势:逃避化学式装饰对HSA结构类型的危害,留存其大自然活性氧。纯化与分析方法:纯化:借助超滤膜(挪作他用原子量100 kDa)或凝露滤出(Superdex 200)清掉未现象生化试剂。分析方法:SDS-PAGE:效验HSA的删改性(分散化条带,无生物降解)。MALDI-TOF MS:测量PEG掩盖数目(分子结构量增强约2-5 kDa/PEG)。DLS:测定方法微米颗粒状的比表面积(80-150 nm)和Zeta电位差(-20至-30 mV)。和谐系统提示:仅在科研工作,无法在身休科学实验!wyh