Cy5.5标记β2微球蛋白,Cy5.5-β2-microglobulin的合成及纯化过程
Cy5.5标志β2微球球蛋白,Cy5.5-β2-microglobulin的镶嵌及纯化时候β2-微球蛋清(β2-microglobulin,β2-MG)是种轻链血浆蛋清,大分子量约11.8 kDa,是内比较重要的免疫抗体调准成分。Cy5.5符号β2-微球蛋清的合成图片及纯化流程针对的目标高質量偶联、纯化分割和質量查重,保持收获架构完整的、的功能可溶性的符号乙酰乙酸。镶嵌流程原科工作:高纯净度β2-MG核蛋白酶水解于缓解液(如PBS,pH 8.0),绝对核蛋白酶可靠性。Cy5.5-NHS酯溶解于无水DMSO中光催化原理贮备液。偶联想法:以尽可能摩尔比(如1:2至1:5,球蛋白:染色剂)将Cy5.5-NHS酯慢慢的滴入至β2-MG盐溶液中,反响在4℃至环境温度下慢慢的摆动,准确时间约2–4小时内。反响材质pH稳定在8.0影响以保证氨基的活性酶类。反响生理机制:Cy5.5-NHS酯与β2-MG的赖氨酸残基ε-氨基发生了亲核被淘汰,构成安全酰胺键,进行荧光记号。该阶段不须催化剂的作用的作用剂,情况平稳,有效的解决蛋清男变女。影响中止:倒入甘氨酸等散布氨基成分围合未反映的NHS酯,解决下一步反映,维持箭头终产物。纯化具体步骤透析或凝胶的作用滤水:选用透析(MWCO 3-10 kDa)或抑菌凝胶过滤水柱(如Sephadex G-25)取除徘徊未反应迟钝染剂和小原子核沉淀物,获得了粗纯品。便捷色谱仪色谱(HPLC)纯化:进步骤凭借反相HPLC(RP-HPLC)纯化,选择C18柱,均值洗刷(乙腈-水,含微量分析TFA)分离法图标血清质与未图标血清质及副结果。监测数据光的波长设为280 nm(血清质)及675 nm(Cy5.5),证实纯品峰。纯品自身及精炼:处理梦想峰,冷却干能够纯高、稳定的的Cy5.5-β2-MG粉末状生成物。线质量检查质谱分折:证实符号碳原子量与学说值吻合器,安全验证偶联非常成功。UV-Vis和荧光光谱分析:检则Cy5.5的代谢峰和荧光反射,测试纺织染料催化活性和偶联成功率。SDS-PAGE及抗体痕印:校验蛋白质系统性和标出问题。
产品名称:Cy5.5标签β2微球蛋清,Cy5.5-β2-microglobulin
色度:95%+特性:气体或夜体存放生活条件:-20°C吹干阴凉维持包裝的规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需保证)公司:杏彩体育平台 生物工程仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.06.23