齐墩果酸（Oleanolic Acid, OA）的荧光标记技术

1. 荧光标记原理与策略

齐墩果酸分子含有羧基、烯烃结构，可通过“羧基–氨基”或“羧基–羟基”形成酯、酰胺键与荧光染料偶联。常用染料包括FITC（异硫氰酸荧光素）、Cy5、Cy5.5、Alexa Fluor 和 DyLight 系列。

a. FITC标记

化学发应方式：OA–OH（酯化）或OA–COOH（酰胺）与FITC异硫氰酸基发应，标识后荧光在充分调动 ~490 nm，放出 ~520 nm。特别：制造费低、常见高倍显微镜专用，荧光承载力适度，但光氯漂较显著的 。

b. Cy5/Cy5.5标记

措施：通过Cy NHS酯与OA的羧基化学反应转换Cy5-OA/Cy5.5-OA。优劣势：近红外增加（≈650–700 nm）、发（≈670–720 nm），背景图低、吸收深 。广泛应用典例：Cy5-OA应用于小鼠原位肺部恶性肿瘤三维成像，在肺部恶性肿瘤连接荧光数字信号严重低过肝功能，适于雷达回波图监测站药材丰度 。

c. 其他染料

Alexa Fluor 647、DyLight 650/680 可以使用于多出入口显像。那些固化的标签成功率高、光比较稳明确优；需会根据器材兼容提升源。

2. 实验流程与注意事项

合成视频的条件：OA与荧光NHS酯（Cy5、FITC等）在干澡DMSO或DMF中，入驻偏碱促进剂（如TEA或DIPEA），在常温2–4 h。纯化关键步骤：的反应后用硅胶制品柱或半配制HPLC纯化，证实单峰。

表征确认：

MS 或 HR-MS 证实分子结构量变化；荧光光谱仪检验记号学习效率；核磁证实的关键官能团的联系（酰胺或酯键转变成）。海洋生物利用：血生殖细胞/部分动物研究前保障删去氧化钙含量颜料，并判断血生殖细胞致癌性（MTT、CCK-8）。

3. 应用示例

細胞成相：Cy5-OA能用的 于共集焦体视显微镜看細胞内产品定位系统，如共产品定位系统线粒体、内质网或脂滴 。体中影像：按照小动植物活体荧光影像仪，可以于探测用量分布不均及沉淀。术中导行、肉瘤gif动态探测兼有实力 。排泄规则深入分析：荧光构造變化凸显OA宣泄、排泄情况发生。 

用途：仅应用于科研，不能用于人体实验！

以上资料由小编zhn提供，仅用于科研

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