FITC-Hemoglobin（绿色荧光素标记血红蛋白）定制合成技术

技术概述

FITC（荧光素异硫氰酸酯）是一种广泛应用于蛋白质标记的绿色荧光染料，可与蛋白质中的**胺基（主要为赖氨酸残基）特异性共价结合。将FITC与血红蛋白（Hb）**偶联，不仅能实现Hb在体内的可视化追踪，也可用于氧输运研究、光热治疗载体标记、蛋白转运示踪等方向。

合成工艺流程

1. 材料准备

猩红核蛋白（人源/牛源）FITC（溶解DMSO或碳酸盐抗震液）降低液：0.1 M 碳酸氢钠降低液，pH 9.0

2. FITC标记反应

将Hb溶解性于碳酸盐保护液中（1–10 mg/mL）。进入FITC氢氧化钠溶液（摩尔比FITC:Hb ≈ 10:1），背光作用4–12 h，温度因素掌控在4°C。反响过程中中适度混和，以防止蛋白酶沉淀自己。

3. 分离纯化

适用Sephadex G-25凝露吸附柱或超滤膜（10 kDa膜）出掉未结合起来的FITC。可进行透析进而一个脚印消除小氧分子。

4. 标记效率评估

使用的太阳光的紫外线-看得出光分光光度计判断280 nm（核蛋白）和495 nm（FITC）消除。估算标注度：FITC/Hb摩尔比导致用荧光光谱仪（λ_ex=495 nm, λ_em=519 nm）明确荧光效能。

5. 储存条件

闭光、4°C储存于PBS或HEPES中，不要一直冻融。

技术亮点

FITC标识永久保存Hb设备构造和功能键，使用在于活体影像、肿瘤细胞摄取量科学研究。工艺流程柔和，适用大投资规模生态学标识制法。可户外拓展为氧挥发多维分析探析网站。 

产自：渭南杏彩体育平台 菌物

功用：科研工作

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