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荧光标记修饰细胞膜囊泡技术(如外泌体)定制技术
发布时间:2025-07-15     作者:zhn   分享到:

荧光标记修饰细胞膜囊泡技术(如外泌体)定制技术

1. 技术概述

细胞膜囊泡(如外泌体Exosome、微泡Microvesicles、膜纳米囊泡Nanovesicles)是天然来源的纳米载体,参与细胞间通信和药物递送。通过荧光标记这些囊泡,可实现体内外成像、分布追踪、摄取研究等目的。

2. 荧光染料类型与选择

膜荧光有机染料:DiI(红)、DiO(绿)、DiD(远红)、DiR(近红外)等。亲脂性荧光素:PKH26、PKH67 等,放到脂三层。荧光蛋清融入图标:如CD63-GFP/CD9-RFP,使用基因绘制的细胞系。量子点标签:维持高,可长久显像。

3. 标记方法与流程

技巧一:膜染法(间接掺染)

适用于DiI、DiO、PKH系列染料
步骤如下:

将纯化外泌体与活性染料事业液(PBS或就稀释的Diluent)混合法。遮光孵育 5–30 20分钟。用反渗透膜管或超速行驶离心力出掉未结合实际颜料。用PBS重悬,实现定性分析和软件。方式二:相融合淀粉酶法创设表示荧光标识膜球蛋白(如CD63-GFP)维持细胞系株。收录其陪养基生成外泌体,即兑换内源性荧光囊泡。免首次标出,是和动态数据监控器和长期的實驗。方式三:生物制品素-亲和素法外表面修饰语生物体素后接荧光亲和素(如AF488-avidin),大幅提升标注特情人。

4. 标记评价

比表面积判断:DLS 或 NTA(纳米技术粒子跟进分析一下)。荧光光谱图:增强/释放出峰与标出质量法测。TEM/CLSM影像:确认荧光区域与形式留下性。

5. 应用示例

DiR-Exo身体荧光激光散斑,观查外泌体在肝、肺、脑安排的数据分布。PKH26外泌体使用在肉瘤靶点搬家可视化效果。GFP-外泌体城市热力图追综巨噬人体细胞夺取犯罪行为。 

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产地:西安杏彩体育平台 生物

用途:科研


关于我们:

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