荧光标记多肽底物定制技术-西安杏彩体育平台
生物
荧光标记多肽底物定制技术
一、概述
荧光标记多肽底物是一类在蛋白酶活性检测、信号通路分析、细胞成像等方面应用广泛的功能化分子探针。通过在多肽链N端或C端共价连接荧光团,可用于FRET探针、酶切底物、细胞摄取评价等。
二、定制技术路线
1. 多肽结合(固相结合法)通过Fmoc固相合并对策:安全使用氨基树酯的载体转化成对象回文序列;调整链长(5~30个碳水化合物残基);高饱和度(>95%)凭借HPLC纯化;特情人酶切位点设计构思(如DEVD、RRR等)。2. 荧光淡化最常见荧光有机染料:FITC(异硫氰酸荧光素)Cy3/Cy5、FAM、TAMRA、Alexa Fluor 款型可来设计为FRET对(如FAM-TAMRA)掩盖位点首选:N端氨基单独标出;pc端按照联接臂注入;在期间加如连入臂或降解塑料位点(PEG linker、酶切位点)3. 金属接头方案与双标记图片技術食用Lys侧链氨基或Cys巯基注入荧光标注;可构造 酶出错型FRET格局,使用荧光旋钮检测器;连结肽段与多肽检测器相互间顺利通过PEG链柔性板连结。三、定制参数与服务内容
工程 | 原因分析 |
多肽长短 | 5–30 aa |
荧光颜料 | FITC, TAMRA, Cy5, Alexa Fluor 等 |
遮盖位点 | N端、东东助手、Lys侧链等 |
酶出现异常性 | 可开发为MMP、Caspase、Trypsin等甄别底物 |
溶解度标准规定 | >95%,MS鉴别/HPLC报告单 |
交盘结构 | 冻干粉/水硫酸铜溶液,带完全解释书 |
四、应用方向
荧光三维成像电极:主要用于细胞系摄食或精准定位研发;酶特异性检查:如Caspase-3、MMP特异性风险评估;FRET探头:用做蛋白质沟通互动探讨;数字信号转导路劲探索:看作底物筛分APP。相应高性价比:
FITC图标蛋白酶酶激酶(即蛋白酶酶激酶A(protein kinase A,PKA)FITC标出酪氨酸/苏氨酸球蛋白激酶(RACα-serine/threonine protein kinase,Akt1))N6-甲基腺嘌呤的荧光标签FITC符号的卵清球蛋白(FITC-OVA)橙红色荧光图标 Dil-Ac-LDL 染料FITC-WGA 精彩纷呈荧光记号麦胚凝集素 单糖检则硒蛋清O(Sel O)的荧光标识物人茸毛膜促性腺雌激素(hCG)的荧光标记符号 FITC-hCG FITC-Gelonin,荧光标示何首乌FITC/RhB@SilMA 生物技术胺响应的型水疑胶微针贴片