蛋白偶联肽定制技术介绍(Protein–Peptide Conjugation)
蛋白偶联肽定制技术(Protein–Peptide Conjugation)
1. 技术背景
蛋白偶联肽是通过化学或酶促手段将功能性多肽与天然蛋白(如BSA、HSA、OVA、KLH、抗体、酶等)进行共价偶联,以赋予肽分子免疫原性、靶向性或增强其生物学功能。该类偶联物广泛用于疫苗开发、抗体制备、诊断试剂、生物传感与药物递送系统等领域。
2. 可偶联蛋白种类
核蛋白类型的 | 常见范本 | 适用方面 |
质粒淀粉酶 | BSA、OVA、KLH、HSA | 抗原设计的概念、防疫针佐剂 |
酶类蛋清 | HRP、AP、GFP | 激光散斑标记图片、活力性跟踪 |
抗体阳性类蛋白质 | IgG、Fab | 靶向治疗递送、免疫检测组化 |
讯号蛋白酶 | TGF-β、EGF | 生物技术催化活性增加 |
多巴胺受体核蛋白 | Integrin、CD原子 | 受损组织靶向治疗、受损组织摄取量 |
3. 常用偶联方式
偶联策略性 | 基团标准要求 | 接检查是否 | 优点 |
EDC/NHS | -COOH 与 -NH₂ | 酰胺键 | 精典、不稳定性 |
戊二醛化学交联 | -NH₂ 与 -NH₂ | 醛胺缩合 | 温和性、广谱 |
Maleimide–thiol | -SH 与 -Mal | Michael 增加 | 高选定性 |
Click 物理 | -N₃ 与 -C≡CH | Huisgen 环化 | 正交、快速 |
碘代酰胺法 | 半胱氨酸位点标注 | 特异突显 | 精准性的定位手机 |
4. 多肽设计要求
金属接头定制:常下载Gly-Gly、PEG₃等是软性桥粱用途位点爆出:防止要点位点被偶联导致端基装饰:比如N/pc端加入Cys、Lys等偶联位点5. 偶联流程
多肽结合(SPPS):带相应呈现基团血清激活码/体现:借助NHS化、Mal化、碘化补救偶联响应能力提升:缓存数据:PBS、MES、Borate等湿度:超低温或4℃现象分配比例:通畅肽:核蛋白=10:1 ~ 100:1纯化与认可:透析、SEC去除散布肽SDS-PAGE、质谱询问偶联6. 应用示例
OVA-RGD肽:用做T生殖细胞滋养对模型BSA-多肽抗原:备制单克隆抵抗能力IgG-穿膜肽:受损细胞靶向疗法递送治疗药物HRP-标签肽:ELISA测量系统性产地:西安杏彩体育平台 生物
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