TAT-荧光染料偶联肽定制技术-西安杏彩体育平台
生物
TAT-荧光染料偶联肽定制技术
一、技术背景
TAT肽(GRKKRRQRRR)是经典的细胞穿膜肽(CPP),能穿越细胞膜并携带药物、蛋白、核酸等进入细胞。其偶联荧光染料后可实时追踪细胞摄取行为和定位,在细胞成像、运输机制研究中具有重要价值。
二、荧光染料选择与标记方式
常用染料:FITC、Cy5、Rhodamine B、Alexa 488/594;
偶联位点:N端氨基或PC版转化Cys(巯基);偶联方式方法:FITC:与N端或Lys侧链氨基反映;Maleimide染剂:与Cys巯基反响;NHS有机染料:标淮酰胺键偶联。三、合成方法
固相提炼TAT编码序列;N端留着游离于氨基或Cys;活性染料易溶DMSO后加入适量至缓存液中;在闭光下制冷反馈4~12一小时;操作HPLC纯化并经MS明确;必选择PEG连接方式臂(如TAT-PEG-Cy5)增加挠性和定位手机表面粗糙度。四、性能与质量控制
询问标注符号率(1:1或多大标注符号);细胞系摄入速度:荧光显微镜或免疫印迹检则;可论文检测内吞绝对路径(胞吞、胞饮);保持稳定性高量分析:标识物与肽组合保持稳定性高、无自聚。五、应用方向
用作细胞结构核、线粒体、内质网靶向疗法输送机;荧光活体三维成像、肿癌进行透过认证;纳米级药剂装置外面职能化;联办PAMAM、脂质体等的载体来进行递送操作系统调优。产地:西安杏彩体育平台 生物
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