KLH偶联多肽定制技术

KLH（Keyhole Limpet Hemocyanin，钥孔鱼血蓝蛋白） 是一种高免疫原性的大分子蛋白，常作为多肽抗原载体应用于疫苗研发、抗体制备及免疫分析。通过将小分子肽段共价偶联至KLH上，可大幅提高其免疫原性，诱导机体产生特异性免疫应答。

1. 常用偶联策略

a. EDC/NHS缩合不良反应（胺-羧酸）采用多肽上的氨基与KLH血清上的羧基反映；长用于具有赖氨酸残基或N末梢胺的肽。b. 巯基-马来酰亚胺法多肽引进C末半胱氨酸（Cys），与马来酰亚胺体现的KLH化学反应；活性聊天高，形式动态平衡，不干扰KLH主链功能键。c. Click不起作用（尽量少于KLH，偶联有精度高但需不起作用能力提高）；

2. KLH类型与处理

原本KLH（Native KLH）：要用于免疫检测实验设计；KLH质粒载体化呈现型：如Succinylated-KLH、Maleimide-KLH；通常情况先活性KLH，加个入肽段实施定向委培偶联；完工后进行透析或离心力反渗透装置祛除游离于肽段。

3. 定制流程

镶嵌含东东助手-Cys的肽段或赖氨酸多肽；适用Sulfo-SMCC等热塑剂将KLH来进行马来酰亚胺化；实施偶联表现（和气前提条件，4℃遮光）；透析纯化，HPLC或PAGE认可偶联速率；可可以提供偶联率（环境下孔隙率）检查通知单。

4. 应用方向

抗体阳性阳性制取：如多肽抗原制取多克隆抗体阳性阳性（pAb）或单抗；役苗设计规划：如淋巴肿瘤新抗原肽-KLH役苗；免疫细胞的检测标淮物：偶联肽用在ELISA包被抗原。

5. 定制选项

KLH各种载体调试：Native KLH / Maleimide-KLH；偶联高密度调控（低/中/高）；的支持与OVA/BSA對照偶联；可并且出具肽-HSA、肽-BSA等多质粒载体传奇。

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