荧光标记氨基酸定制技术

一、概述

氨基酸的荧光标记广泛应用于蛋白质动态追踪、代谢示踪、酶活分析、信号路径研究等。通过对天然氨基酸或其衍生物进行荧光修饰，可构建荧光探针、标记底物或模拟肽链。

二、定制技术流程

1. 氨基酸等前体选大自然安基酸如：Lys（有–NH₂）、Cys（有–SH）、Asp/Glu（有–COOH）诞生化蛋白质（Fmoc-AAs、Boc-AAs等）2. 荧光染色剂与衔接方试FITC → 反响Lys上的–NH₂NHS-Rhodamine/Cy5 → 胺基偶联Maleimide类荧光染色剂 → 与Cys-SH反應EDC/NHS法 → 应用于氨基与羧基两者的偶联3. 表现生活条件水或DMF管理体制反映pH掌握在 7.4–8.5 相互间反应迟钝准确时间：1~12小时候，闭光4. 纯化与剖析纯化玩法：透析、HPLC、层析进行分析最简单的方法：MALDI-TOF、荧光光谱仪、NMR、MS

三、应用

荧光氨基酸等用做体内的基础代谢示踪荧光有机酸装饰多肽倡导FRET探头核高蛋白定项呈现或特异性监测

四、推荐试剂

实验试剂	系统
FITC、NHS-Cy5	流行荧光图标物
L-Lysine、Cys、Fmoc-Lys(Boc)-OH	较为常用胺基酸底物
DMF、HEPES	高沸点溶剂管理体系
EDC、NHS	酰胺键崔化剂

 

关于我们：

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