供应是一种 FITC标记图片球蛋白的的使用的方法

1.配制易溶0.1M碳酸钠缓存液( pH 9.0 )的待标识血清稀硫酸,含量≥2mg/ml.

2 )融掉FITC于无水DMSO调配成1mg/ml的悬浊液。

3 )这对于1ml蛋清溶剂加盟50μFITC盐溶液,可依照规定每当5μ的量边加边缓缓混合蛋白酶液体;

4 )待需提交FITC填加之后,将症状液于4°C闭光孵育8h ;

5 )入驻NH4CI使其终浓硫酸浓度至50mM , 4°C暂停发应2h ;

6)加进二甲苯青至浓硫酸浓度0.1% ,甘油至溶度5% ;

7 )实现大大小小孔经适宜的凝露过滤清洁层析分离出来检测未被组合的FITC ,分开比率在20,000至50,000 (球蛋清举列抵抗能力)。待凝胶的作用柱平稳后,将上述体现融合波从柱顶释放，

拆开凝露柱,待其任何流入量柱床后,加盟PBS缓存液。

此刻,可不可以转变成三条带: a,快速的走动带,也还是FITC-血清记号物,先被洗刷,大部分于室外光下可看到了; b,慢速移动端带,也是未结合实际血清的FITC和二=甲苯青。短短在PBS储存液家电清洗后被过柱到。

8 )于4°C阴凉储放据此偶联物,参加0.1% ( w/v )叠氮化钠最为-种防锈剂。若淀粉酶密度较低( < 1mg/ml) , 要加入1%BSA做-种蛋清稳定的剂。

9)标识物中荧光素和球蛋白的相对分子质量( F/P )可能够分析495nm和280nm处的吸光值来签定, F/P应应用于0.3-1.0。不低于该身材分配比例则电磁波太低，如果超过该身材分配比例则游戏 背景太高。

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