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关于1M 醋酸锂溶液/乙酸锂溶液的详细介绍
发布时间:2021-02-22     作者:yyp   分享到:

品牌:1M 冰醋酸锂溶剂/乙酸锂稀硫酸

日文名:1M Lithium Acetate solution

描绘:杏彩体育平台  荣誉出品的**发酵粉转换微生物培养基盒常见利用酿酒发酵粉质粒转换工作,该微生物培养基盒考虑中大用户账户的利用日常习惯,分辨给出PEG、LiAc和Carrier DNA饱和溶液,PEG、LiAc均經過滤出菌,Carrier DNA经特别的优化网络进行处理,更可进一步挺高质粒DNA的流量转化利用率。该微生物培养基盒可不同合理需机灵配好的凉茶1 × LiAc溶剂和转化成预混液,既便利运行,又经济性经济实用。

感想怎么写态细胞膜配制:

 

1.活性茵种。-80 ℃同步保存的菌苗在YPDA激发基小米平板电脑上划线,30 ℃培植2-4天。

 

2.挑取酵母菌单菌落在YPDA提升基pad上划3-5 mm的股票短线,30 ℃训练2-4天。

 

3.待酵母粉单菌落长至半径2 mm时,把发酵粉人体细胞育苗到3 mL YPDA透明液体激发基中,30 ℃住宿培植。

 

4.**天转移到带有30-50 mL YPDA介质液体培养出来出来基的半圆瓶中立即培养出来出来,待OD600到达0.4-0.5,3000 rpm离心分离5 min,弃上清。

 

5.石雕文化沉淀用30-50 mL的无茵的去阴离子水悬浮物。3000 rpm离心法5 min,弃上清。

 

6.凝固用1.5 mL 1 × LiAc(150 μL 10 × LiAc Solution加1350 μL无菌操作水)重悬后更改至1.5 mL离心式分液漏斗,3000 rpm抽滤5 min,弃上清。

 

特别留意:10 × LiAc Solution通过pH加载,不用添加图片TE当作保护剂。

 

7.倒入1 mL 1 × LiAc重悬,小体型还原成都按照每管100 μL灌装,采用文库被转化不灌装。

 

8.3000 rpm离心式5 min,弃上清,感悟态细胞膜即制得成功。

 

还要注意:化学合成好的感受到态**之后运行,在第8步离心法前,制冷置于最好不要小于5小时内。

和转化了预混液配比:

 image.png

鲜酵母质粒被转化:

 

1.将360 μL预混液建立1支大量态血组织中,出现吹吸沉垫,使发酵粉血组织完全彻底透明桌面于预混液中。

 

2.30 ℃的水浴锅中孵育30 min,每10 min混匀以此。

 

3.(加进20 μL DMSO,可选装)42 ℃的水浴锅中热击30 min,每10 min混匀1次。

 

4.12000 rpm离心分离15 s,弃上清液。

 

5.(自选进行)用1 mL YPD Plus Liquid Medium二次漂浮,30℃摇床谐振养育30-60 min。12000 rpm离心法15 s,弃上清液。

 

6.注入0.1-1 mL无菌检测去阴离子水或0.9%氯化钠稀硫酸重悬悠长岁月中,涂挑选提升基平板等,30 ℃培養2-4天。

 

酵母粉文库导出:(需注意15-50 mL离心分离管)

 

1. 将2520 μL预混液融入到体验态组织(未分开包装)放置中,之间上下使体验态组织宽裕重悬。

 

2. 防止在30 ℃的水浴锅中孵育50 min,每10 min混匀做次。

 

3.(入驻160 μL DMSO,可以选择)存放在42 ℃的水浴锅中热击30 min,每10 min混匀做次。

 

4. 3000 rpm离心力5 min,弃上清液。

 

5.(要选工作步骤)用3 mL YPD Plus Liquid Medium重悬沉定,30 ℃摇床振动训练90 min,3000 rpm离心法5min,弃上清液。

 

6.倒入15 mL无菌操作去阴阳离子水或0.9% 氯化钠水溶液重悬菌体,涂挑选塑造基安卓平板(50个安卓平板上下),30 ℃养成2-4天。

 

提前准备应当:

 

1.应用分钟需无菌进行进行。

 

2.第一次实用Carrier DNA,请把装配有Carrier DNA的钢管在热开水中烧沸5 min,其次即刻放于冰面,用后-20℃保管预留。之前选用前在冰面解封Carrier DNA。不间断冻融3-5次后需继续转性Carrier DNA。

 

3.PEG饱和溶液在冷藏场景下能溶解性,请于常温的场景下完整溶解性后用到。

 

4. 按照质粒氧化还原电位增减质量,加强酵母粉质粒的饱和度和氧化还原电位能否增长流量转化利用率。

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Y187 Yeast Strain  酵母双杂交用甘油菌 300μl

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yyp2021.2.22