名称大全：Y187-pHis2 Yeast One-Hybrid Media Kit

描绘：

Y187-pHis2 Yeast One-Hybrid Media Kit（鲜酵母单杂塑造基），培养出基以十分的更方便选择的铝箔纸袋主要形式木箱，每一个独立的木箱就可以调制0.5 L的激发出基。安全使用时仅必须将袋中的任何干粉倒半圆瓶或激发出瓶中，注入0.5 L的ddH2O，第三121 ℃无菌15 min就行了。需不需要称取和修整pH值。

实验英文原料：

酵母粉菌株：Y187（的缺陷遗传基因型his3-200、trp1-901、leu2-3）

钓饵形式：pHis2-DNA（选择标上Trp计划书基因遗传His）

文库形式：pGADT7-cDNA（需求标记符号Leu）

测试操作步骤：

一、转化成诱惑膜蛋白

1. YPDA板式锻炼划线，活性Y187鲜酵母菌菌株；挑鲜酵母菌菌落于夜体YPDA的养育液摇菌的养育；

2. 制取感触态并将pHis2-DNA变为步入体会态神经细胞；

3. SD/-Trp华为平板电脑查测转换后果。

二、自更改密码检测工具

1. 准备其他3-AT溶度均值的SD/-His/-Trp板式，3-AT的氧化还原电位一样设制在50-100 mM中，并制定不标3-AT的对比；

2. 将以上所述被转化有机物就稀释到单克隆横向（OD值＜0.002），涂板。

3. 选择出不适合的3-AT盐质量浓度。（如某盐质量浓度3-AT手机平板上的菌落弱小且稀松，与较相比之下相差悬殊看不出，且延长准确时间培养出准确时间也不会会再造长，就是理想型的3-AT含量）

三、互作选择

1. 介质SD/-Trp养成基养成诱耳菌株Y187（pHis2-DNA），光催化原理Y187（pHis2-DNA）体验态受损细胞；

2. 将pGADT7-cDNA文库转为Y187（pHis2-DNA）收获态体细胞；

3. 被转化生成物涂SD/-Leu、SD/-Trp、SD/-Leu/-TrpiPad各一整块，借以计算出转换成转化率率；已满转换成结果全部涂SD/-His/-Leu/-Trp + X mM 3-AT（X为需求所获资金渗透压）扁平50块（φ150 mm），致力于3-5天；

4. 挑取SD/-His/-Leu/-TrpiPad上克隆，PCR后（比较适合SK2420，菌P法），测序认定；

5. 直连验正。

训练基标定手段：

1. 一盒陪养基干粉灌进半圆瓶或陪养瓶中，加0.5 L去化合物水下溶于（琼脂冰水不溶）。

2. 无調整pH值，121 ℃油田灭菌处理15 min。

3. 液状体培植基封好口背光、环境温度永久保存备用电源。

4. 粉状提升基降温到50 ℃之间倒进去平板手机，温度凝露，密封错位4 ℃保留。

3-AT的适用方式：

1.求算需提交pad的总量，配比激发基；

2.放置3-AT的浓硫酸浓度均值；

3.杀菌建立激发基，待激发基散热到55 ℃两边，按设定浓硫酸浓度添加3-AT母液，摇匀后倒板；

4.标识每家uv的3-AT有机废气浓度，超净台降温凝露后，将转变成产品涂板，28-30 ℃培养出3-5天。

供货物料目录索引：

1/2MGY培养基（1/2YNB，用于毕赤酵母，也称MGAs） 2×500ml

1/2MM培养基（1/2YNB，用于毕赤酵母） 2×500ml

2×MDA培养基（用于毕赤酵母） 500mL （2×）

2×MDA培养基（用于毕赤酵母） 500mL×5 （2×）

2×MDH培养基（用于毕赤酵母） 500mL （2×）

2×MD培养基（用于毕赤酵母） 500mL （2×）

2×MD培养基（用于毕赤酵母） 500mL×5 （2×）

5×AP培养基/APD培养基（含葡萄糖，-Ura） 100mL×5

5×AP培养基/APG培养基（含半乳糖，-Ura） 100mL×5

APG培养基（含半乳糖，-Ura） 10×1L

BMGH培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

BMGH培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

BMGY & BMMY基础培养基 10×0.5L

BMGY培养基（用于毕赤酵母） 500ml

BMGY培养基（用于毕赤酵母） 5×500ml

BMG培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

BMG培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

BMMH培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

BMMH培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

BMMY培养基（用于毕赤酵母） 500ml

BMMY培养基（用于毕赤酵母） 5×500ml

BMM培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

BMM培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

MGMa培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

MGMa培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

MGYA培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

MGYA培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

MGYH培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

MGYH培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

MGY培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

MGY培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

MMA培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

MMA培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

MMH培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

MMH培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

MMMa培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

MMMa培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

MM培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

MM培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

PAD Agar培养基Kit 10×0.5L

RD Agar培养基Kit 10×0.5L

RD Agar培养基Kit 10×0.1L

RDH培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

RDH培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

RD培养基（用于毕赤酵母） 2×500ml

RD培养基（用于毕赤酵母） 10×500ml

YPD/YEPD培养基（用于毕赤酵母）（溶液） 2×500ml

YPD平板 （9cm）10个

毕赤酵母MDA培养基 10×0.5L

毕赤酵母MDH培养基 10×0.5L

毕赤酵母MDH平板 （9cm）10个

毕赤酵母MD培养基 10×0.5L

毕赤酵母MD平板 （9cm）10个

毕赤酵母MGYH平板 （9cm）10个

毕赤酵母MGY平板 （9cm）10个

毕赤酵母MMH平板 （9cm）10个

毕赤酵母MM平板 （9cm）10个

毕赤酵母PAD平板 （9cm）10个

毕赤酵母RDH培养基 10×0.5L

毕赤酵母RDH平板 （9cm）10个

毕赤酵母RD培养基 10×0.5L

毕赤酵母RD平板 （9cm）10个

毕赤酵母筛选培养基套装（PichiaPink表达系统） 1Set

刚果红YPD平板（9cm） 10块

缺精氨酸APG培养基（含半乳糖，-Ura） 10×1L

yyp2021.2.22