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DiR标记内脏脂肪来源外泌体

一、染料概述

DiR就是一种近红外脂阴离子型荧光纺织纺织染料，应归碳氢链修饰语的Cyanine类纺织纺织染料，增加激发光谱约为748 nm，卫星发射激发光谱约为780 nm，选用作机体外成相。因此其程度亲脂性，能放到外泌体膜，选用作跟踪外泌体的区域划分和集运。

二、标记原理

内脏器官脂肪堆积源外泌体（Visceral Adipose Tissue-derived Exosomes）兼有关键的脂质双层玻璃膜，DiR根据疏水之间功效嵌入脂膜，出现比较稳定的荧光标签型式，不会影响外泌体功能性或型式。

三、实验步骤

1. 外泌体提取：收集脂肪组织来源培养上清，离心法或超滤法富集外泌体；
2. DiR染料溶液制备：使用DMSO溶解DiR后稀释入PBS，控制终浓度一般为1 μM；
3. 标记反应：与外泌体在37℃孵育15–30分钟；
4. 去除游离染料：超速离心或使用Exosome Spin Columns分离；
5. 验证标记效率：通过激光共聚焦、IVIS系统或流式细胞术观察荧光强度。

四、应用价值

体中追查科研：用做小鼠内脏器宫、肺、肾等器宫靶向疗法科研； 判断企业摄食情形：通过观察植物脂肪堆积来自外泌体在靶五官的生物富集功能； 分解探析：与过胖、分解综合评估征、胰岛素抵*等锁定系统探析。

五、注意事项

操作前脱水颜料，避开奠定； 把控颜料氧化还原电位，以免 自密集荧光电磁干扰； 是储存于闭光4℃，短期的内利用。