FITC荧光标记的原理是什么？具体操作步骤如下：

　　(一)原理

　　现如今广泛用于表面抗原标记符号符号的荧光素基本有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate，FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200，RB200)。在性因素下FITC的碳酰胺键可与表面抗原赖氨酸的E氨基共价结合起来实际，标记符号符号后的表面抗原仍实现与以及抗原结合起来实际的实力。在荧光灯源红外光谱线或兰紫光提高下引起黄黄褐色荧光，对其进行在荧光显微镜下观察植物或普鲁士蓝染色肿瘤细胞仪剖析可对以及抗原对其进行相关性、分析或按量的验测。

　　(二)操作步骤

　　将纯化的IgG免疫抗体阳性对PH9~9.5碳酸盐缓存数据液透析住宿，透析后免疫抗体阳性液移入小烧杯里称取過量FITC，进入二甲亚硕(DMSO)(FITC-1mg/1ml DMSO)使终氨水浓度值为1mgFITC/1mlDMSO FITC/IgG身材比例怎么算：如IgG氨水浓度值为1mg/ml，FITC/IgG身材比例怎么算约为50ugFITC/mgIgG;　　如IgG为5~10mg/m1，则正比为25μgFITC/mlIgG 在10ml小烧杯杯先倒入表面抗原　　按以上的配比将FITC-DMSO液体逐加入适量入透析后的表面抗原液体里把图标物用PBS加至2.5m1，磁力链接混合器室内温度下遮光混合2h。　　用PD10柱(SephadexG25柱)除开游离于于荧光素，先用25m1PBS淋洗G25柱收录PBS洗刷**个荧光素相结合核蛋白峰，测定方法F/P比率，**个荧光素峰为游离于于荧光素。

　　计算公式得：靠谱的F/P指标值2~4。

　　(三)试剂器材

　　1.纯化的多克隆抗原或单克隆抗原。　　2.FITC(Fluorescein-5-Lsothiocyanalte)或一些荧光黑色素。　　3.PBS、DMSO 4.PH9~9.5碳酸盐响应液：Na:CO34.3g,NaHCO38.6g加萃取水至500ml。　　5.PD10柱(SephadexG25柱)　　6.磁链接搅拌机器，红外光谱分光光度计等

　　(四)注意事项

　　1.FITC另存于4℃D暗处，在使用前待制剂瓶上升到高温时开盖称取，以制止潮解。　　2.FITC-DMS0液要临用时配置。　　3.碳酸盐缓冲器液要最新鲜调配。

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产品名称	规格
FITC-Avidin	1mg(2.5mg/ml)
FITC-HA MW:500K	100mg
壳寡糖-FITC	100mg
FITC-Dextran MW:20K	10mg
Concanavalin A-FITC	5mg(1mg/ml)
FITC-Dextran MW:500K	100mg
FITC-Dextran MW:100K	50mg
PPS50K-PEG4K-FITC	100mg
FITC-Dextran MW:5K	50mg
FITC-Dextran MW:40K	10mg
SH-PEG1K-FITC	100mg
FITC-Dextran MW:100K	10mg
FITC-壳寡糖-油酸	10mg