UDP 糖|根据FuncLib突变NGT以独特的糖为底物生产微均相糖肽
n -糖基化是胆固醇质英译后最终要的装饰中的一个。
菌中现实存在胞质可可溶性n -糖基转移酶(Cytoplasmic soluble N-glycosyltransferase, NGT),它能将不同的单糖从糖核苷酸转移到多肽的NXS/T(X≠Pro)共识序列上。
当下通讯报道的NGT酶可以将多种不同的糖转移到蛋白质中,这将导致糖链的异质性以及糖肽类结构和功能的复杂性和不稳定性。
跟据FuncLib算法,我们从ApNGT中获得了底物特异性更高的突变体ApNGT- p1 (the NGT from actinobacterus pleuropneumae)。
与纯天然型ApNGT相比,突变型ApNGT- p1只能利用UDP-Glc作为糖供体。ApNGT-P1的**温度为40℃左右,PBS缓冲液的**pH为7.5-8.0。ApNGT-P1对K+、Mn2+、Ca2+和Mg2+具有较好的耐受性,但受到Na+、Cu2+和Zn2+的强烈**。
该甲基化体也可以于**生产的糖基化多肽或糖基化位点包括均衡红葡萄糖水的核营养物质。
前者,本操作为进一点调查挺高ngt供体基质选择性提供了可行的途径。
UDP-L-RhaNAc | UDP-4n-D-FucNAc |
UDP-D-XylNAc | UDP-VioNAc |
UDP-2-Biotinyl-GalNAc | UDP-6-Biotinyl-GalNAc |
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