Calcein tetraethyl acid，4`,5`-双[N,N-二(羧甲基)氨甲基]荧光素的化学反应因素

4’,5’-双[N,N-二(羧甲基)氨甲基]荧光素，通常称为Calcein tetraethyl acid，是荧光素衍生物的一种，广泛用于细胞活性检测、金属离子示踪及荧光成像研究。其分子结构由荧光素核心与两个N,N-二(羧甲基)氨甲基取代基组成，取代基通过氨甲基桥接连接到荧光素的4’、5’位置。

Calcein tetraethyl acid呈强有机荧光，发挥峰约在495 nm，放射峰约在515 nm，量子成品率高、光增强性比较好。团伙空间结构中包含有多羧基，使其在水相和缓冲标准中间距溶解度，并极具比较好的塑料铝阳正离子螯合性能。荧光程度对塑料铝阳正离子酸度敏锐，最合适适用塑料铝阳正离子判断、渗透性有机染料标记符号及膜光泽感性工作。2. 电化学组合而成特征

1. 荧光素核心
   荧光素核心提供稳定的共轭体系，使分子具有强荧光发射。共轭平面结构确保荧光量子产率高，适合细胞及分子示踪实验。

2. N,N-二(羧甲基)氨甲基取代基
   两个N,N-二(羧甲基)氨甲基取代基赋予分子水溶性和离子化能力，同时提供螯合金属离子的位点。羧基的存在使Calcein tetraethyl acid在缓冲液和水溶液中高度分散，不易聚集，同时可与钙、镁等二价金属离子形成稳定配合物。

3. 功能化特性
   分子末端羧基可与氨基化分子形成酰胺键，便于化学标记和共价结合，使Calcein tetraethyl acid可用于荧光标记、探针合成及载体功能化。

3. 响应状况Calcein tetraethyl acid的提炼和技能化一般注意包括羧基纯化、氨基偶联及降低安全体系操作，注意现象经济条件以下的：

1. 羧基碱化

• 安全使用N-羟基琥铂酰亚胺（NHS）或一样滋养实验试剂将羧基转成为渗透性酯。
• 不起作用在有机化学稀释剂（如DMF或DMSO）中开展，以以确保活性有效率和消融性。
• pH设定在弱碱范畴（pH 7–8）可优化提升活性和才能减少副表现。

1. 氨基偶联影响

• 纯化羧基与氨基化底物（如多肽、脂肪酸质或小原子核）在减慢液中反馈出现酰胺键。
• 湿润状况下完成（空调温度至37℃），响应时候一般 为1–12小时内，以担保响应可以且以免荧光素结构特征挥发。

1. 缓解制度选定

• 作用多在PBS（聚磷酸盐缓解液）或HEPES缓解液中实施，pH维护在7.2–8.0。
• 保护模式需逃避高溶度废金属化合物或强防还原剂，当心抑制羧基纯化或荧光数据。

1. 纯化与固定性分析

• 反應顺利完成后使用高效能液质色谱（HPLC）、凝露渗透法或透析纯化副生成物，祛除未反應免疫试剂和副副生成物。
• 结果在常温、遮光具体条件下贮藏，可增加荧光的性能和化学式可靠性。

产品名称：4’,5’-双[N,N-二(羧甲基)氨甲基]荧光素

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