iFluor 594 Styramide，iFluor 594 酪胺的合成步骤概述
iFluor 594 Styramide，iFluor 594 酪胺的提炼部骤概括
iFluor 594 Styramide 是由高性能荧光染料 iFluor 594 与酪胺（tyramine）偶联而成的荧光底物，光谱性质与 Alexa Fluor 594 接近，是一种发射在可见红光区的荧光探针。其典型激发峰约 590 nm，发射峰约 615–620 nm，亮度高、光稳定性强、抗漂白能力优于传统罗丹明类染料，并在中性至弱酸/弱碱条件下保持稳定信号。与 iFluor 488、647 等形成光谱区分，可用于多重标记。
酪胺（styramide，Tyramide）一些在过硫化反应物酶（HRP）离子液体下被硫化反应为独立基，该独立基可与淀粉酶质或组建化中的酚基、酪氨酸残基共价结合起来，往往该团伙是“酪胺数据警报调小（TSA）”技术性的基本化学制剂其一。在免疫系统荧光、原位杂交育种 (ISH)、组建化显像可以将数据警报精确度度提拔 10–100 倍，并实现了高稳固性和低背景图。二、合出关键步骤简述（实践室级设想）iFluor 594 Styramide 的合成图片首要包含两个部份：荧光染剂母核的创建与淡化，以其酪胺的偶联想法。事实产出中也许 就有 iFluor 594 活力性酯或后面体，故此之下为日常电化学行车路线的简易逻辑性。步 1：共建 iFluor 594 染色剂骨架iFluor 594 是一种修复罗丹明类或半菁（carbopyronine）类有机颜料。经常从馨香胺/苯酚类始点物与酮或酯缩合产生二芳基酚酞内酯架构，再采用官能团形成设定电子为了满足电子时代发展的需求，特点，荣获吸收率/释放出在 590 nm 以内的有机颜料。那么将母核采取磺化或加上性侧链，改善水可溶及抗聚在一起性。步凑 2：引用可偶联的生物位点成了与酪胺造成不稳定性键，经常在有机肥料染料一面转化羧酸（–COOH）、特异性酶酯（如 NHS-ester）、异硫氰酸酯（–NCS）或卤代特异性酶位点。适用性的是 NHS 酯，这是因为它能与伯胺如何快速造成酰胺键，且适用性于水/有机肥料共混标准体系。多见最简单的方法：按照氨基与琥铂酸酐不起作用加入 –COOH；继续使用 EDC/NHS 或 DCC/NHS 碱化添加 iFluor 594 NHS-ester。环节 3：酪胺的做好准备酪胺（p-hydroxyphenethylamine）其实质就含伯胺和酚羟基，进来伯胺为偶联位点，酚羟基为后继与靶标共价融入的活性氧位。因而在偶联环节需防护酚羟基禁止副的反响（如食用 TBDMS 或 Bn 防护）。防护后补齐伯胺以与纺织染料的反响。方法步聚 4：偶联作用（关键点方法步聚）在无水 DMF 或 DMSO 中，将 iFluor 594 NHS-ester 与保护性后的酪胺在温和性碱（如 DIPEA 或 TEA）具备下攪拌，恒温或略降温 1–4 h。作用自动生成 iFluor 594–(酰胺)–酪胺后面体。部骤 5：脱养护若酚羟基被防护，需求按照酸（如 TFA）、氢解（Pd/C + H2）或氟化物（如 TBAF）彻底清除防护基，完全恢复活力性酪胺架构。部骤 6：纯化通常用配制型 HPLC（反相 C18）、硅胶制品柱层析或亚铁离子相互交换柱洗去未发生反应化学药品、分不高子悬浮物。对脆弱活性染料需阴凉进行操作。方法 7：定性分析与证明¹H NMR / ¹³C NMR 形式判定MS MALDI/ESI 数据分析大分子量HPLC 纯净度（>95%）UV-Vis / Fluorescence 光谱图法测定消化吸收与发射卫星峰pH 性能分析性、光性能分析性风险评估产品名称：iFluor 594 Styramide
饱和度：95%+特性：液體或液體存放环境：-20°C干澡阴凉存为设计品种：50mg 100mg 250mg 500mg（按需可以提供）制造厂：杏彩体育平台 动物
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