FITC-Lignoceric Acid,异硫氰酸荧光素标记木蜡酸的合成及纯化过程
FITC-Lignoceric Acid,异硫氰酸荧光素标示木蜡酸的获得及纯化过程中
FITC-Lignoceric Acid 是由长链饱和脂肪酸木蜡酸(Lignoceric Acid, C24:0)与异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate,FITC)偶联形成的荧光标记分子。木蜡酸分子结构中含有24个碳的直链饱和骨架及末端羧基,FITC通过其异硫氰酸基(–N=C=S)与含胺基底物共价连接,实现脂肪酸的荧光化改性。该偶联分子可用于脂质膜研究、脂肪酸追踪及荧光分析实验,为脂质化学研究提供可视化工具。
可能木蜡酸羧一般身不遵循与FITC一直不良的体现的效果,应该实现生物热塑性树脂带来可不良的体现的胺基。可用攻略 是凭借EDC(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺)/NHS(N-羟基蜜腊酰亚胺)指标体系,将木蜡酸羧基滋养为NHS酯中部体。NHS酯具有着积极的亲核性,可在和缓條件下与伯胺或仲胺不良的体现,制成木蜡酸-胺随之出现物(Lignoceric Acid-Amine)。该步骤之一在空调温度有机的石油醚中实现,以防止高温高压或强酸强碱碱條件对长链脂质酸骨架存在被破坏,一起确保脂质酸的疏水性树脂和生物详细唯一性。自后,将木蜡酸-胺衍化物容解于弱是碱性的缓存数据液(pH 8.0–9.0)中,建立FITC。FITC的异硫氰酸基与胺衍化物的伯胺或仲胺造成亲核加强不良反應,变成维持的氨基异硫氰酸酯(thiourea)键。不良反應往往在空调温度闭光情况下来进行,提防FITC光降解或存在副不良反應。不良反應用时可按照其和转化了有效率控制,通常情况为数H至住宿,担保偶联终产物变成。不良想法到位后,标准中含有FITC-Lignoceric Acid、未不良想法的FITC及一少部分副产品。为刷快高饱和度产品,需完成精密纯化。纯化方式 其中包括硅胶制品制品柱色谱和高效能液质色谱(HPLC)。硅胶制品制品柱色谱可利用脂质酸疏水溶解性别差异完成分开法,HPLC则打造最高识别率,使用电性或疏水梯度方向洗刷改变阶段目标产品分开法,并可根据荧光检测工具实时的把控FITC标志物的地域分布。纯化后的FITC-Lignoceric Acid一般性呈淡黄色至黄色胶体,具备固定水溶解性或可不能溶解含一少部分有机酸溶液的缓存数据液。设备构造表现包涵核磁共震(^1H-NMR、^13C-NMR)手机验证偶联位点及骨架删改性,质谱(MS)提高大分子量信息内容判定偶联货物。红外光谱图分析-隐约可见光谱图分析提示 FITC-Lignoceric Acid在约495 nm处有获取峰,荧光光谱图分析在约520 nm处发射卫星光,表示荧光能要保持维持。那些表现的方式要判定货物设备构造的删改性与功效性,为上下游实验性提高靠普保证质量。结合及纯化的过程 中,应从紧控制表现热度、pH及闭光必要因素,预防FITC化学降解或副表现诞生。一同,进行酌情石油醚风险管理体系和纯化的方式,确定皮脂酸长链骨架和荧光团能力不在不良影响。某个程序流程涉及到木蜡酸羧基纯化、胺产生化、FITC偶联、表现必要因素推广及纯化定性分析,确定荣获空间结构删改、荧光能力较好的偶联物品。上述讲到阐明,FITC-Lignoceric Acid 的制作而成及纯化原则以催化利用率和物品效果性为核心理念,采用构成动态平衡的thiourea键,满足碳水化合物酸与FITC的合理有效结合起来,为脂质研究探讨概述、荧光探测及概述工作出具可以信赖的信息可视化器具。其制得具体方法充分考虑组成部分全面性、荧光机械性能动态平衡性及工作可用性,是碳水化合物酸标上研究探讨概述里常用的水平交通路线。产品名称:FITC-Lignoceric Acid
溶解度:95%+相对性状:固态物或液态贮藏條件:-20°C低温干燥背光保留再生规格为:50mg 100mg 250mg 500mg(按需供给)制造厂家:杏彩体育平台 海洋生物