FITC-Wogonoside,异硫氰酸荧光素标记汉黄芩苷的合成思路
FITC-Wogonoside,异硫氰酸荧光素标出汉黄芩苷的提炼难点汉黄芩苷(Wogonoside)就是种黄大环内酯配糖体,包括留存于成药黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的尖部。它由苷元汉黄芩素(Wogonin)与红提葡萄糖水醛酸经过糖苷键对接而成,原子组成中含有多酚羟基和糖尖部分。汉黄芩苷因抗空气氧化、处理独立基和生物体工程渗透性而遭到了解,但其应该用遭到容解性和可视化数据欠佳的禁止。经过与异硫氰酸荧光素(FITC)标签,可制取受到FITC-Wogonoside,其兼有黄酮苷的生物体工程功能模块与FITC的墨绿色荧光数据信号,满足应用于细胞膜成相、基础代谢前提条件科研及配体通过实验所。分解设想FITC原子含带异硫氰酸基团(–N=C=S),一般说来与氨基发应转化稳定可靠的硫脲键。以至于汉黄芩苷原子本来存在矿酸氨基,往往必须要先对其对其进行检查是否延伸化,常用技巧是凭借引进氨基的功能化基团,最终得以为FITC打造偶联位点。制成步数步:汉黄芩苷碱化与淡化汉黄芩苷中富含羟基(–OH),就能够采取碳二亚胺(如EDC)和N-羟基琥铂酰亚胺(NHS)碱化方式方法,引进羧基中体。将产甲烷后的汉黄芩苷与乙二胺(EDA)发生不起作用,让 氧分子上带来伯氨基(–NH₂)。也许得到了氨基化汉黄芩苷发展物,为事件调查偶联FITC提供数据发生不起作用基团。第十二步:FITC标志反應将氨基化汉黄芩苷不能溶解性碳酸氢钠缓冲器液(pH 9.0),FITC溶解性于少量的DMSO或DMF中,接着迟滞参加到悬浊液中。异硫氰酸酯基团(–N=C=S)与伯氨基有亲核加的反馈,转化成硫脲键(–NH–C(=S)–NH–)。现象先决条件需闭光、在常温搅拌设备,一般来说长期12–24小的时候。第一步:乙酰乙酸纯化将反应迟钝液复制到氧分子式量挪用10–20 kDa的透析袋中,在去阳离子河中透析48个小时这些,这段时间次数更換透析液以清理游走FITC和小氧分子式残渣。经微冻干热得出墨绿色荧光粉状,即FITC-Wogonoside。第五步:浅析方法浅析紫外光-看得出光谱分析:查测490 nm左右两边的FITC特征描述吸引峰。荧光光谱仪:考察520 nm散发峰,查证荧光安全性能。红外光谱图(FTIR):的检测硫脲键的结构特征吸附峰。核磁共鸣(NMR):进一大步核验遮盖地点及设备构造发生改变。技能关键环节抗震液的选择:安利碳酸氢钠或NaHCO₃抗震液,以维护弱强碱自然环境。石油醚配量:FITC溶解于DMSO,但DMSO比列过高会不良影响多糖或苷类稳相关性高性,需提高在总体目标积10%下面。摩尔比把控好:常采用了FITC与氨基比例怎么算为1:5至1:10,以预防频繁热塑或荧光猝灭。
产品名称:FITC-Wogonoside,异硫氰酸荧光素标记图片汉黄芩苷
溶解度:95%+遗传性状:固态物或介质液体保持情况:-20°C粗糙阴凉保持打包尺寸:50mg 100mg 250mg 500mg(按需打造)生产厂:杏彩体育平台 动物