概述
sulfo-Cyanine3 dUTP是一种功能化核苷酸衍生物,由脱氧尿苷三磷酸(dUTP)与sulfo-Cyanine3荧光染料共价连接而成。其结构在保持dUTP天然性质的同时,通过Cyanine3荧光提供强烈的橙红色荧光信号。sulfo修饰提高了染料的水溶性和稳定性,减少非特异性结合,使其在体外和细胞实验中表现出良好的兼容性和信号稳定性。
实验应用
sulfo-Cyanine3 dUTP可用于DNA标记、探针制备、原位杂交(FISH)、DNA复制研究以及细胞增殖追踪。在DNA合成过程中,它可被DNA聚合酶掺入新合成的DNA链,从而实现可视化和定量分析。结合多通道荧光成像技术,科研人员可以同时使用其他荧光标记进行多重检测,实现对不同DNA分子或细胞状态的同步观察。
优势特点
Cyanine3染料具有高亮度和光稳定性,适合在复杂样本中使用,如细胞或组织切片。sulfo修饰增强了染料在水溶液中的溶解性,减少了沉淀和非特异性结合,提高实验信噪比。此外,该化合物与DNA聚合酶兼容性良好,掺入效率高,信号均匀且稳定。
实验注意事项
实验操作时应避免强光照射以减少荧光漂白。掺入效率可能受DNA聚合酶类型和反应条件影响,因此需根据实验需求优化浓度和反应时间。在细胞或组织成像实验中,合理选择掺入时间、染色条件和洗涤步骤,可获得均匀、稳定的信号分布。
研究价值
sulfo-Cyanine3 dUTP在DNA复制监测、细胞周期分析、核酸标记及探针制备中具有重要应用。通过直接标记新合成DNA,科研人员可以观察细胞DNA合成情况,分析细胞增殖和基因调控机制。其橙红荧光信号低背景、稳定可靠,适合高通量和多重标记实验,为分子生物学研究提供直观和可靠的数据支持。
总结
总的来看,sulfo-Cyanine3 dUTP是一种亮度高、水溶性优良、光稳定性强的荧光核苷衍生物。它兼容DNA聚合酶掺入机制,可用于DNA标记、细胞追踪及多通道荧光分析,为基础研究和应用实验提供了稳定、可靠的工具。