FITC-D-Galactose，异硫氰酸荧光素标记D-半乳糖的反应条件
FITC-D-Galactose，异硫氰酸荧光素标示D-半乳糖的不良反应状态
异硫氰酸荧光素标记D-半乳糖（FITC-D-Galactose）是一类由荧光素异硫氰酸酯（FITC, Fluorescein isothiocyanate）与单糖D-半乳糖通过化学偶联反应得到的荧光探针。D-半乳糖是自然界常见的己糖，分子中存在多个羟基基团及还原端的醛基或其衍生结构，可被进一步修饰为氨基糖或在特定位点引入伯胺官能团，以便与FITC发生共价结合。FITC分子骨架由三芳环共轭体系构成，光学性能优异，在近中性环境下具有高摩尔消光系数（~7.5 × 10⁴ M⁻¹·cm⁻¹）和强绿色荧光（激发波长495 nm，发射波长520 nm）。其活性基团异硫氰酸基（–N=C=S）具有较强的亲电性，能够与氨基化的半乳糖分子发生加成反应，形成稳定的硫脲键。通过这一修饰，产物既保持了半乳糖分子的亲水性与生物识别能力，又赋予其荧光标记功能，可用于细胞糖代谢研究、糖受体识别分析、糖-蛋白相互作用监测及分子示踪。该化合物通常以冻干粉末形式保存，水溶液应避光低温储存以保证荧光稳定性。
反應前提条件：FITC-D-Galactose的分解成可以正确操控发应水平，以可以保障荧光基团的不稳定量分析性和切合效果。第一步，前体D-半乳糖需由项目前期淡化，常采取完美重现胺化（Reductive amination）做法在完美重现端导入伯胺基团，如以氨基化化学制剂（乙二胺、氨水）在钠氰硼氢化物来源于下发应，所以实现中含伯胺的半乳糖诞生物。此步凑确认糖量子具备着与FITC偶联的活性酶位点。马上又，做出FITC标示发应：1）相转移催化剂选定：常选用结合型喂养相转移催化剂组织体制，如碳酸氢盐缓存数据液（0.1 M NaHCO₃，pH 8.3）与少量出DMSO或DMF的结合型喂养组织体制。水相担保半乳糖并衍生物的容解性，DMSO/DMF则提生FITC的容解度。2）pH状况：的不良反应标准体系需稳定在弱酸碱度学习环境（pH 8.0–9.0）。在这里状况下，伯胺确保较高的去质子化配比，亲核性增强学习，优势于与FITC的–N=C=S基团的不良反应。一起弱碱状况也防止出现FITC在偏酸状况下进行分解或荧光淬灭。3）溫度与的精力：基本在空调温度表（20–25 ℃）背光先决经济条件下搅拌机体现迟钝，体现迟钝的精力为4–12钟头。若我希望的提升体现迟钝能力，可在轻度变多（30–37 ℃）先决经济条件下开始，但过高溫度可能性出现FITC挥发或副体现迟钝加大，故此需稳定性能力与产出率。4）摩尔比：想法物配比正常为FITC：氨基半乳糖 = 2:1或3:1，以为了保证半乳含糖量子上的氨基位点充沛与FITC想法，同样用随后纯化剔除未想法的FITC。5）表现形式监视器录像：表现形式阶段可进行薄层色谱（TLC，荧光检侧）或优质色谱仪色谱（HPLC）监视器录像，FITC标上代谢物一般是表现形式出突出的环保荧光带。6）纯化技巧：表现做完后需去掉量过大FITC和副物品。可用技巧有透析（氧分子量截取1000–3000 Da）、凝胶的作用活性炭过滤层析（Sephadex G-25）或反相HPLC纯化。得出物品一般而言以冻干粉末状模式手机截图。7）表现与查证：物质的化学工业结构的可利用ESI-MS、MALDI-TOF根本碳原子量，¹H NMR（若分解性允许的）用在剖析硫脲键形成，分光光度计-可見消化光谱分析仪与荧光光谱分析仪用在查证FITC标上的光学材料特征参数。在实验操作软件应用中，FITC-D-Galactose的悬浊液制法是需要阴凉，且高性价比互溶PBS、HEPES或Tris保护液。如果需要常年补充，可以冻干后在-20 ℃另存，并在运行前现配水悬浊液以长期保持荧光生物。产品名称：FITC-D-Galactose
溶解度：95%+遗传性状：固状或流体存储必要条件：-20°C缺水背光包存设计规格为：50mg 100mg 250mg 500mg（按需带来）生产厂：杏彩体育平台 生物制品
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