Sulfo-CY5-TCO,水溶性花菁染料CY5标记反式环辛烯的合成步骤概述
Sulfo-CY5-TCO,水可溶花菁颜料CY5图标反式环辛烯的聚合步凑分析
Sulfo-Cy5-TCO 是一种水溶性近红外花菁染料衍生物,其结构由 Cy5 荧光核心与反式环辛烯(trans-cyclooctene, TCO)官能团通过共价连接形成。Cy5 核心具有吸收波长约 650 nm、发射波长约 670 nm 的光学特性,具备高量子产率、良好光稳定性及低自发荧光背景,适合用于生物成像、分子标记及活体追踪。为了提高水溶性和生物相容性,Cy5 染料骨架常在苯环或吲哚环上引入磺酸基(–SO₃⁻),形成 Sulfo-Cy5-TCO,可在 PBS、HEPES、Tris 等水性缓冲液中稳定溶解,同时减少非特异性吸附和聚集。TCO 官能团是一种应力环烯烃,可与叠氮或四氮杂环(tetrazine)发生高速生物正交 Diels–Alder 反应,实现无需金属催化的特异性偶联,是生物正交化学和活细胞标记中的理想反应基团。
大分子形式作用Cy5 关键:具备近红外荧光数据,是原子核检测器的光电可溶性中央。磺酸基团:增添团伙水可溶性和负电势,降非特喜欢的人联系,加快微生物相溶性。TCO 官能团:刚度环烯烃结构类型可与 tetrazine 更高效会发生 inverse electron-demand Diels–Alder (IEDDA) 发生反应,体现快捷、特异、金属制只有的生物工程正交偶联。分解步凑简要Sulfo-Cy5-TCO 的制取具体以及下例关健步驟:Cy5 基本系统化从水无水磷酸氢 Cy5 核心区开始,借助羧基或 NHS 酯运用滋养端基。可用 NHS 酯或碳二亚胺(EDC)纯化羧酸的技巧,使染色剂在清新前提条件下可与亲核胺或醇反应迟钝。TCO 并衍生物备考反式环辛烯大部分在有机酸生成配制含催化活性末中端 TCO 研究物,比如说 TCO-NH₂ 或 TCO-PEG-NH₂。PEG 链适用于增大水溶解性,提升微海洋生物相匹配性,并展示办公空间位阻以以减少有机染料与微海洋生物氧分子间的共同不干扰。Cy5 与 TCO 偶联凭借酰胺化表现:Cy5-NHS 或碱化羧酸与 TCO-NH₂ 在抗震液(pH 7–8)中表现,建立安稳的酰胺键。表现因素温暖,一般在制冷下 1–2 分钟详细,以长期保持 Cy5 主要光学玻璃耐磨性和 TCO 设计详细性。纯化环节不起作用后机制涉及到 Sulfo-Cy5-TCO、未不起作用的 Cy5 和 TCO 及副生成物,必须要采用 HPLC、妇科凝胶筛选或透析做脱离。纯化加强组织领导终产品更具高荧光讯号、正常水无水磷酸氢及怪物正交反应迟钝可溶性。定量分析核实UV-Vis 光谱分析:挥发光的波长 650 nm,挥发峰流畅,显视 Cy5 核心思想完正。荧光光谱仪:释放出主波长 670 nm,证实荧光稳定性。质谱(ESI-MS 或 MALDI-TOF):核对大分子量不符合 Sulfo-Cy5-TCO 概念值。NMR(¹H NMR):观察植物 Cy5 体系化与 TCO 偶联特证峰,核验分子空间结构空间结构。应用软件意义Sulfo-Cy5-TCO 按照 TCO 与 tetrazine 的髙速 IEDDA 发应,可保证生物工程正交标示和活癌细胞激光散斑,需不需要铜催化氧化,应对不锈钢问題。其水无水磷酸氢和光维持性使其在核营养物质标示、微米的载体实用功能化及原子核电极激发中有操作的价值,同时常用于实时更新搜寻原子核趋势学和抗癫痫药物分布图制作调查。产品名称:Sulfo-CY5-TCO,水可溶花菁颜料CY5标示反式环辛烯
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