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Sulfo-Cy3-ethanediamine,水溶性花菁染料CY3标记乙二胺的制备方法
发布时间:2025-09-28     作者:axc   分享到:
Sulfo-Cy3-ethanediamine,水可溶花菁有机染料CY3箭头乙二胺的制法形式

Sulfo-Cy3-ethanediamine为一类水溶性花菁(Cyanine-3)荧光探针,其花菁骨架上含有磺酸基(sulfo)以提高水相溶解性,且通过酰胺键连接一分子乙二胺(ethanediamine),保留一个游离伯胺供进一步官能化或直接用于偶联。此类探针在可见光区有强吸光与高荧光量子产率,典型吸收峰约在550±10 nm,发射峰约在560–570 nm,摩尔消光系数大(约10^5量级),适用于荧光显微、流式细胞及原位标记等生物影像与分析应用。由于磺酸基的存在,水溶性好、在生物缓冲液中分散性佳,且相对减少非特异性疏水吸附。

提纯(概况):经常用到措施为以Sulfo-Cy3-NHS(滋养的N-羟基蜜腊酰亚胺酯酯)与乙二胺展开亲核结合在一起发生反应,转化成个人目标酰胺副产物。常见实操方案有以下:高沸点溶剂与生化采血管预备:称取合适的Sulfo-Cy3-NHS,放置于非常干热无水DMF或DMSO中分解(酸度视规模性而定,通常1–10 mM)。另备无水或非常干热的乙二胺作过多会的亲核生化采血管(常常用10–50倍当量)或以乙二胺水氢氧化钠溶液并配合有机质碱(如DIPEA或三乙胺,0.5–2当量)以提高不起作用并阻止生产的酸。添加了奇奇怪怪与化学发应必备条件:在惰性课堂气氛下(离氮气或氩气),常温(0–5 ℃)下将乙二胺变慢入驻Sulfo-Cy3-NHS溶剂,随即回温至常温并搅拌机化学发应1–4小的时候。NHS酯对水敏锐,若在水相化学发应,可选取缓存数据模式(pH 8.0–8.5的碳酸盐缓存数据或聚磷酸盐缓存数据)并最快完全以变少水解反应。不起作用监督:主要包括薄层色谱(TLC,不一直是选用水无水磷酸氢染剂)、反相HPLC或LC-MS监督不起作用速度:观察植物NHS前体峰缩减与关键物品峰转换。停此反應与粗清理:反應完工后参加不过要适水稀释液同用乙酸或稀酸调至碱式盐以解除反應,若有未反應的咖啡因中毒乙二胺,需用拨干或透析过程清理(但分子式量异同小,一般说来还不够破乳)。纯化:高性价比应用反相C18柱的半制作或制作HPLC完成纯化,流失相适用水(含0.1%三氟乙酸或甲酸)与乙腈或甲醇的均值过柱。获得计划峰并冻干得白色的至橙黑色固态物。表现:用高区分质谱(HR-MS)认可分子结构量,用1H NMR(若相转移催化剂与移动信号合法)、UV-Vis(测吸收能力谱并选择λmax)、荧光光谱仪(测发峰、量子成品率)同时反相HPLC(分析溶解度)表现乙酰乙酸。纯化与存放:纯品通常情况下冻干后在-20 ℃背光存为,溶剂用女性生理加载时防范波动冻融或用背光、超低温短期贷款存为。推荐以暗瓶或镀铝包含存为,太久以干燥的保鲜冷库为宜。准备特别考虑:操作方法流程时准备NHS酯与胺反响吸热与稀释剂相溶性;乙二胺甲醛释放与影响性比较强,操作方法流程需要补风橱中并穿戴或许防护武器。以免太阳光照与强空气氧化性条件以免染色剂可降解。于微海洋生物偶联时需彻底清除祛除游离子胺和小氧分子悬浮物,以保证事件偶联会可选择性与微海洋生物相溶性。

产品名称:Sulfo-Cy3-ethanediamine

色度:95%+遗传性状:固态或固态贮藏水平:-20°C潮湿阴凉保留封装规格参数:50mg  100mg  250mg  500mg(按需打造)设备厂家:杏彩体育平台 生物工程

Sulfo-Cy3-ethanediamine

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