Cy5-phosphoramidite,花青素cy5荧光染料标记氰基-磷酸盐的反应步骤及机制
Cy5-phosphoramidite,花青素cy5荧光染色剂标出氰基-磷酸二氢钠的想法步聚及逻辑
Cy5-phosphoramidite是一种将近红外荧光染料花菁素Cy5通过磷酰胺化学修饰转化为活性磷酸酰胺单元的功能性化合物。其核心结构由Cy5荧光团与磷酰胺基团(phosphoramidite)通过有机连接器连接而成。该结构不仅保留了Cy5的强荧光特性,同时提供了可用于核酸或寡核苷酸自动合成的活性磷酸酰胺位点,使其能够在DNA、RNA及类似寡聚物中实现共价偶联标记。Cy5-phosphoramidite应用于荧光探针合成、分子、核酸检测及活体成像研究。
反映方法流程及缘由荧光团纯化最先将Cy5染剂引用可影响的羟基或氨基端,采用生产组成措施引用接器链(如短链醇、胺或PEG链),导致可与磷酸酰胺影响的后面体。这一大步有效确保Cy5与磷酰胺基团当中有合适的的空间,防止出现荧光淬灭,同样做到磷酸酰胺基团的影响活力性。磷酰胺化的反应将纯化的Cy5上面体与氰基-磷酸二异丙基酯(cyano-phosphoramidite)在干燥处理有机质的石油醚(如二氯二氧化氮、乙腈)中通过偶联反應。此通过为典型示范的磷酰胺化学式反應:上面体的羟基或氨基对磷原子核结构举办亲核反攻,加入石油醚中易离去基团,生产Cy5-phosphoramidite。反應平常在弱酸碱度或含有有机质的碱(如DIPEA, diisopropylethylamine)的因素下通过,以做到磷原子核结构正处于纯化壮态并提升 偶联质量。生理反应保护好与水平抑制在一个偶联步骤中,需严苛除掉人体水分,以防止止磷酸酰胺被水电离。不良反应迟钝在惰性有机废气气体(如离氮气或氩气)护理下来进行,高温操纵在0–25°C,既担保不良反应迟钝运行速度,又减掉Cy5荧光团的光腐蚀或挥发。偶联货物的纯化反映完整后,大部分可以通过硅胶制品柱层析或优质高效液相色谱(HPLC)纯化受到Cy5-phosphoramidite代谢物,洗去未反映的Cy5里边体和副代谢物。代谢物纯度大,可真接适用全工控设备寡核苷酸制成或另外的生物学标识实验性。寡核苷酸标示软件Cy5-phosphoramidite在DNA或RNA分解的时候中最为下端表达模快或內部标识模快建立。其磷酸酰胺活力位点使用系统工业自动化分解实验仪器与寡核苷酸的3’-羟基产生电化学影响,建立相对稳定的磷酸二酯键, 保障荧光团牢固性地优化到寡核苷酸骨地上。标识完毕后,Cy5荧光团在650 nm提升、670 nm发射点波长打造微弱信息,达成荧光的检测、参考值定量分析及活体激光散斑。特质与好处高相对安稳度分析:生成的磷酸二酯键在内分泌系统场景下相对安稳,好内外实验设计。荧光力度高:Cy5基本点构造保障了近红外荧光数据信息,拉低背静打扰。产品名称:Cy5-phosphoramidite
饱和度:95%+物理性质:固态物体或夜体储放能力:-20°C低温干燥闭光储存再生外形尺寸:50mg 100mg 250mg 500mg(按需可以提供)生产厂家:杏彩体育平台 生态学