Cyanine5-Hemoglobin，，花菁颜料CY5标识符号血红色蛋白质的标识符号想法猩红淀粉酶（Hemoglobin, Hb）就是种团伙式量约 64 kDa 的四聚体球状淀粉酶，由多条 α 链和多条 β 链组成的，一条链有猩红素基团，兼备多个赖氨酸残基用做为普通机械淡化位点。将花菁颜料 Cy5 偶联至猩红淀粉酶上，不错搭配出既具备氧融入的能力又兼备荧光因素的探头团伙式。Cy5-Hb 的合成视频的路线重要分为下列些方法步骤：蛋清预外理选取高饱和度的人或部分动物源赤红蛋白酶，不能溶解 pH 7.4 的 PBS 缓解液中，氧化还原电位一般而言设定在 1–5 mg/mL。为减掉环境串扰，一般而言要透析的还原溶物和分太低子基础代谢物。有机染料纯化选用 Cy5-NHS ester 最为记号前体。NHS 催化活性酯可与血清中赖氨酸残基的 ε-氨基迅速有酰胺化反馈，制成安稳的共价融入。Cy5-NHS ester 溶水于无水 DMSO 或 DMF 中，减少在水里面晚到淀粉水解灭活。图标发应将 Cy5-NHS ester 溶剂很快填加猩红蛋清溶剂中，通畅以 Cy5 与 Hb 氧分子比是 5–10:1 是 喂料比。不起作用在恒温下实现，响应模式恢复在 pH 8.0 两边，以确定赖氨基长期处在去质子化模式，有利与 NHS 酯不起作用。不起作用时为 1–2 个钟头，需阴凉搅拌装置。停止与纯化反应迟钝实现后，加盟 Tris 缓冲区液或无水乙醇胺全封闭残存的活性氧酯基团，不要进步骤非特男人突显。紧接着操作透析（10 kDa 膜）、凝胶的作用脱水层析（Sephadex G-25）或离心力反渗透装置等最简单的方法洗去徘徊 Cy5 染色剂。纯化后氢氧化钠溶液呈现出来暗紫色带荧光的本质特征。物质研究方法代谢光谱仪：在 540 nm 和 576 nm 处为猩红球蛋白的关键 Soret 带，一并在 640 nm 处造成 Cy5 的特点代谢峰；荧光光谱分析：激励可见光波长 640 nm，使用峰座落在 670 nm；电泳介绍：SDS-PAGE 信息显示赤红球蛋白条带地方没问题，并可依据荧光扫面验收 Cy5 标记符号；质谱或 MALDI：是因为核蛋白原子核线质量增长，反映有 Cy5 偶联。图标度调整一般是在 2–4 个 Cy5 原子/每个 Hb 四聚体时，既可兑换强些荧光手机信号，又不用会印象猩红蛋清的构象与系统。过度的记号机会会印象猩红素联系位点，大幅度降低氧感染力。会自动储存与APP

Cy5-Hb 溶液应在 4 ℃ 避光保存，加入 10% 甘油可增强稳定性。冻干后可长期保存于 −20 ℃。该标记物常用于血红蛋白在体内分布研究、血管成像、氧输运探针及与纳米载体复合物的构建研究。

上述讲到，Cy5-Hemoglobin 的生成路径来源于 Cy5-NHS ester 与血清质赖氨基的酰胺化的反应，具有着极有效率、缜密、水平一个温和的结构特征。该荧光猩红血清质不但留下了氧结合实际特性，还掌握荧光多维分析系统，为血动力系统学、血清质运输物流及生态学激光散斑研发给予了梦想设备。

产品名称：Cyanine5-Hemoglobin，，花菁颜料CY5标上血红色淀粉酶

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