Cy5-Tobramycin,花菁染料CY5标记妥布霉素的反应步骤
Cy5-Tobramycin,花菁活性染料CY5符号妥布霉素的想法部骤
Cy5-Tobramycin 是通过在氨基糖抗生素妥布霉素(Tobramycin)分子上引入花菁染料Cy5标记而形成的荧光探针复合物,其制备步骤通常基于妥布霉素分子上多位伯胺和仲胺的高反应活性。妥布霉素属于氨基糖苷类抗生素,分子含有多个氨基和羟基,能够与活化的染料分子通过酰胺化或点击化学形成稳定的共价结合。其标记步骤通常分为以下几个环节:
首选,必须要 的选择好的Cy5产生物。通用的是中含 NHS酯(Cy5-NHS ester) 或 异硫氰酸酯(Cy5-ITC) 的滋养颜料,例如无机化合物要能特喜欢的人地与伯胺反映添加平稳的酰胺或硫脲键。仍然妥布霉素氧分子上的氨基较多,为规避过头标识,必须要 按照掌控摩尔比、反映时段和缓存液的pH来抽选绘制层次,大部分通过 pH 8.0~8.5 的碳酸盐缓存液,以狠抓氨基位于去质子化心态,提供与Cy5-NHS的反映转化率。不良生理发应方法平常也包括:将妥布霉素分解于缓解液中,并稳步加进分解在DMSO中的Cy5-NHS ester氢氧化钠溶液,变缓搅伴不良生理发应2–4个钟头。不良生理发应的过程 中,调控Cy5与Tobramycin的摩尔比在 1:1至1:3范围内,以确定刷出单个标志产品而不会数十位交连。成功完成不良生理发应后,普通需用凭借透析、凝胶的作用脱水色谱(如Sephadex G-25)或反相HPLC清掉未不良生理发应的优质纺织染料。在相应状态下,也都可以应用 弹窗药剂学绘制 来实现了Cy5与Tobramycin的偶联。列举,先确认药剂学手段在妥布霉素的氨基上对接叠氮(–N3)或炔基(–C≡CH)绘制,然后呢应用包含不同官能团的Cy5衍化物(如Cy5-DBCO或Cy5-alkyne)确认铜崔化或无铜应力应变环炔弹窗反應偶联。这一种手段的优势是位点采用性非常好,副反應减少。终赚取的Cy5-Tobramycin可经过质谱(MALDI-TOF)、太阳光的紫外线-由此可见吸取的目的光谱图仪(测试Cy5在650 nm身边的吸取的目的峰)、荧光光谱图仪(Ex/Em约为649/670 nm)和HPLC饱和度测试来展开定性分析。全化学反应进行便利,也能在温暖状态下做完,既保持良好了妥布霉素的结构特征抗逆性,又增添其安稳的红区荧光符号,适当于抗菌药分布图制作与目的规则的探析。产品名称:Cy5-Tobramycin,花菁染色剂CY5标记图片妥布霉素
纯净度:95%+相对性状:膏状或固体贮存标准:-20°C烘干背光保持包装设计規格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需供给)厂:杏彩体育平台 动物