Cy5-Doxorubicin,花菁染料CY5标记阿霉素的反应条件
Cy5-Doxorubicin,花菁染剂CY5标上阿霉素的反应迟钝具体条件
CY5-Doxorubicin 是由花菁染料Cy5与蒽环类药物阿霉素(Doxorubicin, DOX)共价偶联而成的荧光标记药物。阿霉素具有蒽环平面骨架和氨基糖残基,能嵌入DNA双螺旋并抑制拓扑异构酶II活性,从而发挥作用。其分子中存在的伯胺(主要位于糖基部分)是与荧光染料偶联的主要位点。通过Cy5-NHS ester活化酯与DOX氨基反应,可以形成稳定的酰胺键,得到CY5-Doxorubicin。该衍生物不仅保留了阿霉素的药理活性,还引入了近红外荧光信号,使其适用于药物递送研究、体内分布监测和实时成像。
作用因素不起作用底物准备好阿霉素(DOX)需不溶弱强酸性水硫酸铜溶液(如PBS, pH 6.5–7.0),以有保障糖基氨基居于可不良反应感觉。Cy5-NHS ester需互溶DMSO或DMF等有机酸相转移催化剂,不要溶解解离。缓存工作体系考虑现象一半在无胺缓解液中实施,如HEPES或碳酸盐缓解液(pH 7.4–8.5)。较高pH不有利氨基的去质子化,增加亲核性,而使增进与NHS几丁质酶酯的缩合。的反应前提的温度:经常在温度(20–25 ℃)下做好,以持续阿霉素组成部分稳定可靠。日子:发生反应需闭光搅拌机2–6小时内,以事关全部偶联。摩尔比:Cy5-NHS与DOX摩尔比常以2:1或更快,以驱动响应齐全。增添剂:可合适的加盟三乙胺或DIPEA等弱碱,保持合适的的pH区域并增进缩合作用。纯化的时候偶联不起作用顺利完成后,不起作用液上常有未不起作用的Cy5、游离于DOX及副代谢物。普遍的纯化方式例如:光催化原理型HPLC(RP-HPLC):用阿霉素与Cy5偶联物的永久保存期限不一致性确定分离出来。超滤膜离心分离管:用做洗去小碳原子未表现活性染料。冻干:终得到了红紫无水硫酸铜生成物。机构验证质谱(MALDI-TOF, ESI-MS):判定原子核量与空间结构。UV-Vis 光谱仪:直接在线检测阿霉素的480 nm溶解峰和Cy5的650 nm溶解峰,以校验交叉结构特征。荧光光谱分析:检则近红外试射峰,为了保证荧光使用性能未受损害。总结会CY5-Doxorubicin 的制作而成要素就在于NHS酯与伯胺的缩合表现,因素和气、表现错误率高。货物集于一身阿霉素的催化活性与Cy5的近红外荧光性状,运用于食用的类药递送体系中设计方案、食用的类药身体里匀称显像、神经元摄入探讨及协力实验英文。其制作与表现因素的实时控制性,使其是无线连接食用的类药与团伙显像方法的关键性桥面。产品名称:Cy5-Doxorubicin,花菁活性染料CY5箭头阿霉素
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