CY5-CSTSMLKAC，花菁有机染料CY5标示CSTSMLKAC心肌靶向疗法肽的获得方法流程发展历程

CY5-CSTSMLKAC是一种基于荧光染料与心肌靶向肽偶联的荧光探针，其中CSTSMLKAC为来源于噬菌体展示筛选得到的心肌组织高亲和性肽序列，能够选择性结合心肌细胞或心肌组织相关受体，在纳米药物递送和组织成像中被研究。其氨基酸序列两端含有半胱氨酸（Cys），可通过二硫键形成稳定环状结构，从而增强空间稳定性与受体结合能力。同时，序列中的丝氨酸（Ser）、苏氨酸（Thr）和赖氨酸（Lys）提供了亲水性与额外的偶联位点，使其适合在水相条件下进行化学修饰。将近红外花菁染料Cy5标记在该肽段上，不仅能赋予探针优异的光学成像能力，还能保留其心肌靶向特性，因此CY5-CSTSMLKAC被认为是一种兼具成像与靶向功能的双功能分子。

自动合成步驟简要多肽结合CSTSMLKAC肽段通适用固相兑换法（SPPS）准备。适用的策咯为Fmoc固相兑换：在聚酯聚酯硅橡胶（如Rink amide聚酯聚酯硅橡胶）上日趋转化哪几个Fmoc保障的蛋白质竞聚率。每个人重复分为清除Fmoc保障、蛋白质滋养与缩合想法（适用HBTU/HOBt或DIC/Oxyma做缩合剂）。兑换完毕后，将肽链从聚酯聚酯硅橡胶上切除术，并清除侧链保障基团，能够 粗肽。粗副产物依据反相高效率的液质色谱（RP-HPLC）实施纯化，之后用质谱（MALDI-TOF或ESI-MS）询问编码序列与团伙量。若要要环肽方式，可在兑换后依据气腐蚀反应或DMSO腐蚀反应完成Cys-Cys二硫键的达成，以此兑换格局稳定可靠的环状CSTSMLKAC。Cy5滋养活性染料的取舍Cy5用作花菁有机染料，常以吸附性酯或马来酰亚胺表现形式会存在。若要凭借赖氨酸残基的ε-氨基或N端氨基与Cy5偶联，待选装择Cy5-NHS ester，凭借与胺基反映转换成安全的酰胺键；若凭借半胱氨酸残基进行位点特异形偶联，则待选装择Cy5-Maleimide，与巯基进行Michael增益反映确立硫醚键。对于那些CSTSMLKAC衡量，末web端Cys残基可用作偶联位点，所以说Cy5-Maleimide是惯用使用，可提高认识荧光标志的位点特异形，逃避被破坏赖氨酸在微生物识別中的反应。偶联响应将合成视频并纯化后的CSTSMLKAC可溶性高，溶解于水的于缓解液中（如PBS或HEPES，pH 7.2–7.4），以抓好巯基确保还原系统态。常需要加入TCEP或DTT预操作当心止Cys建成二硫键。然后，将Cy5-Maleimide溶解于极少量DMSO并逐中滴加入肽硫酸铜溶液中，在空调温度下背光攪拌数半小时。反馈流程中，巯基与马来酰亚胺基团讯速相结合，产生稳定性的硫醚键。反馈结束之后，用到超滤膜或HPLC转移弄掉未反馈的游离态纺织染料，实现任务终产物CY5-CSTSMLKAC。纯化与询问物品纯化具体按照制法型RP-HPLC，测量主波长可设定在220 nm和650 nm，以也监控设备肽链与Cy5染色剂。回收用方向峰后冻干，得到澄澈的CY5-CSTSMLKAC。结构的认可一般说来进行质谱剖析（MALDI-TOF或LC-MS），核查理论研究氧分子量与亲测值以认可偶联取得胜利。进一次都可以用紫外光-隐约可见光谱分析仪与荧光光谱分析仪测量其获取与射峰是与Cy5相符，保障光电使用性能坚持。研究方法与技术应用印证终生成物CY5-CSTSMLKAC应成绩出Cy5共同点的近红外发射点峰，并增加肽段的心肌靶向治疗疗法药物性能。其安全性可经由在有所差异pH、温度表和生物制品机质中的荧光增加率参与检验。技能上，可在上皮细胞技术或两栖動物模形中参与靶向治疗疗法药物工作，经由共瞄准显微镜观察或小两栖動物活体影像模式监测其在心肌组织机构中的聚集环境，因而验收其作靶向治疗疗法药物影像检测器的APP成长性。

产品名称：CY5-CSTSMLKAC

色度：95%+遗传性状：固态或粘液存储條件：-20°C干燥的闭光上传包装设计外形尺寸：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供数据）公司：杏彩体育平台 生物体

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