CY5.5-Andrographolide，花菁染料CY5.5标记穿心莲内酯的表征方法
CY5.5-Andrographolide，花菁活性染料CY5.5图标穿心莲内酯的研究步骤步骤
CY5.5-Andrographolide 是一种由产物穿心莲内酯（Andrographolide）与近红外花菁染料CY5.5偶联而成的荧光探针分子，兼具小分子骨架的生物活性与荧光团的光学特性。穿心莲内酯是一种来源于穿心莲属植物的二萜内酯，分子中含有多个羟基（主要位于C-3、C-19和C-14位置）和内酯环结构，为化学修饰提供了可利用的官能团。CY5.5则属于对称性较高的花菁染料，发射波长约690–710 nm，激发在675 nm 左右，处于近红外区，具有高量子产率、良好的水溶性和低背景干扰。将两者结合得到的CY5.5-Andrographolide在结构上表现为：穿心莲内酯通过活性羟基与CY5.5上的NHS酯或类似活泼酯键合，形成稳定的酯键或碳酸酯键，从而在保持小分子骨架基本完整性的同时赋予其荧光可追踪特性。
纯化的过程CY5.5-Andrographolide的转化成不起作用一般是在无水情况下采取，最常见DMF或DMSO看做容剂，在强碱储存液（如三乙胺或DIPEA）发生下将CY5.5-NHS ester与穿心莲内酯中可爱羟基偶联。不起作用结束了后需要去掉未不起作用的活性染料和小原子副生成物。纯化常主要包括一些步骤之一：粗纯化：将体现液采用旋蒸清除生物碳高沸点溶剂，余留物用去阳离子水与乙腈混合型析出，并举行液液浓缩以除去不可溶性硫氰酸盐。柱层析分割：待选用反相C18硅胶材料柱，以水/乙腈（含0.1%三氟乙酸或甲酸）为冲洗掉安全体系参与系数冲洗掉。伴随CY5.5颜料更具热烈的UV紫外线-隐约可见汲取网络信号，关键产品在254 nm或680 nm处更具阀值，从而容易整理。准备型HPLC：因为收获高饱和度代谢物，一般主要采用准备型提高效率液质色谱做好终纯化。C18柱要求下，以水（含0.1%TFA）与乙腈均值冲洗掉，整理相匹配留下时间段的单峰混合物。纯化后代谢物冻干存有，受到红蓝紫色固态物体纳米银溶液。定量分析技巧对CY5.5-Andrographolide的定量分析往往通过光谱分析学、质谱及核磁嗡嗡声等多种类：紫外光-隐约可见光谱仪（UV-Vis）：代谢物在675 nm前后诞生强吸附峰，基本性优点的CY5.5优点吸附峰，另在320 nm处可观的察到穿心莲内酯那部分的吸附。偶联成功的后，染剂吸附峰的位置基本性不会变，但摩尔吸光常数消减，揭示染剂大分子场景發生变。荧光光谱图仪：提升主波长约675 nm，试射峰在690–710 nm之中，荧光光谱图仪性状与游离子CY5.5类似的，解释有机染料在偶联后仍维持发亮因素。质谱（ESI-MS 或 MALDI-TOF）：大原子核铝离子峰突然出现在基础理论大原子核量各自的m/z值处，可确定任务类化合物的大原子核的安全性能，偶联结果较解离穿心莲内酯和CY5.5均發生的安全性能偏位，满足估计。核磁震荡（¹H NMR, ¹³C NMR）：可以说到穿心莲内酯特点卫星警报（如内酯环质子δ 6.5–7.0空间）、染剂芳环卫星警报，衔接位点羟栽培基质子卫星警报熄灭，取代发生酯键有关的卫星警报，进第一步校验偶联取得成功。HPLC含量数据深入分析：选取数据深入分析型C18柱查测，CY5.5-Andrographolide一般现示为形式化峰，含量相当于95%上。动态平衡性自测：在PBS缓存数据液中（pH 7.4，37 ℃）完成动态平衡性查测，活性染料与穿心莲内酯区间内的酯键在一定的时段内保持着动态平衡，难于发生的解离，要确保探头在日常实验性状况下的稳定性。笔者认为，CY5.5-Andrographolide就是种集于一身生成物设备构造的特点与近红外光电技术性能参数的标志氧分子型式，其合成图片方法明了，纯化依赖于制取型HPLC，分析方法则进行UV-Vis、荧光光谱图、质谱和NMR等多认可设备构造与含量。同类生成物为探讨小氧分子型式生成物在多样化海洋生物指标体系中的匀称、定位系统和互相使用供应了举例子的荧光可视化分析道具。产品名称：CY5.5-Andrographolide，花菁纺织染料CY5.5记号穿心莲内酯
纯净度：95%+相对性状：固态物或液态贮存前提：-20°C干躁闭光包存包装箱型号规格：50mg 100mg 250mg 500mg（按需给予）厂：杏彩体育平台 生物学
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