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CY3-Streptavidin,花菁染料CY3标记链霉亲和素的反应条件
发布时间:2025-09-17     作者:axc   分享到:
CY3-Streptavidin,花菁染剂CY3标记图片链霉亲和素的表现能力

Cy3-Streptavidin是将花菁染料Cy3共价偶联至链霉亲和素(Streptavidin, SA)形成的荧光标记蛋白,用于生物检测、分子示踪和免疫分析。链霉亲和素是一种由四聚体蛋白组成的细菌来源蛋白,具有高亲和力和特异性结合生物素(Biotin)的能力(结合常数Ka≈10¹³–10¹⁵ M⁻¹),应用于生物标记、免疫检测、蛋白固定化及纳米技术研究。Cy3是一种红橙色荧光染料,吸光约550 nm,发射波长约570 nm,具有高量子产率和良好光稳定性。通过Cy3标记,链霉亲和素在保持生物素结合活性的同时,可实现荧光示踪,用于多种生物实验和分子成像研究。

发生反应经济条件不良反应设计原理Cy3纺织染料往往以几丁质酶酯样式(如NHS酯)提供了,与链霉亲和素淀粉酶的赖氨酸侧链氨基出现亲核被淘汰症状,建成安稳的酰胺键。该共价偶联期间应属清新的淀粉酶质检查是否呈现症状,往往不要破碎淀粉酶的两级组成或海洋生物素相结合几丁质酶。降低体制选定 生理影响需要适于pH的储存液中展开,以衡量核球蛋白构造安全不稳和氨基生理影响活性酶类。最常用储存管理体制为pH 7.4–8.5的磷酸二氢钠储存液(PBS)或碳酸盐储存液(0.1 M NaHCO₃),pH过低会变低氨基的亲核性,而pH过高已经造成核球蛋白构象不安全不稳或自聚众。储存液中防止出现使用的含胺类或硫醇类采血管(如Tris、DTT、β-巯基无水乙醇),严防与NHS酯良性竞争生理影响。Cy3与链霉亲和素摩尔比偶联化学反应平常用到Cy3与SA球血清质的摩尔比是3:1至10:1,可基于需要标上容重控制。低摩尔比可切实保障球血清质生态学菌物化,高摩尔比可增加荧光难度,但可能会影响到球血清质折起来或生态学素按照专业能力。标上容重平常按照UV紫外线-可看见光谱仪测定方法Cy3吸光度与球血清质溶液浓度相对分子质量通过估评。热度与期限调节症状在较温度度(0–4℃)或环境温度條件下使用,平常坚持1–4一小时。较温度度能够促进恢复蛋清稳定性处理高性,少聚众或光降解。过多的症状时期机会会会造成非特异形偶联或蛋清要素性变。轻缓攪拌可担保症状均匀分布,防止位置浓硫酸浓度过高会造成蛋清聚众。溶液与染色剂水解Cy3-NHS酯需融掉于小量可挥发的高沸点溶剂(如DMSO或DMF)演变成高浓硫酸浓度存储液,如果比较慢进入水球蛋清饱和溶液中,应对可挥发的高沸点溶剂百分比过高(一般不超越5%),尽可能的防止发动机组升温球蛋清变形。不良反应撤消与纯化的影响达成后,可在假如甘氨酸或Tris抗震液停止未的影响的生物酯。其次需出掉氧化钙含量Cy3染色剂以得到 纯静的Cy3-Streptavidin,惯用技巧收录透析、疑胶过虑色谱(如Sephadex G-25)或反渗透膜。纯化步骤中需保持良好高温和抗震液安稳性,规避球蛋白降解。终产物保持稳定量分析与儲存纯化后的Cy3-Streptavidin可在PBS缓解液中稳定的存贮,并参与低盐浓度防腐施工剂(如0.02% NaN₃)解决办法生物学体生态破坏。遮光存为于4℃预期采用,-20℃可以用于常年存贮。荧光效能和生物学体素综合可溶性在适当的条件下可持续大半年至一个月。总结报告Cy3-Streptavidin可以借助NHS酯内容的Cy3与链霉亲和素赖氨酸氨基共价偶联成型,反應必须要在pH 7.4–8.5保护液中超高温轻掺和采取,摩尔比求反應时刻需升级优化以维持荧光的强度和球血清怪物制品几丁质酶。反應完全后可以借助透析或凝露过虑清掉徘徊染剂,刷出高溶解度Cy3-Streptavidin。该荧光标识球血清构建了Cy3信息可视化特点与SA高柔软性怪物制品素构建性能特点,应运于抗体查测、分子结构示踪、荧光影像和怪物制品材质标识等调查采集体系。

产品名称:CY3-Streptavidin,花菁染色剂CY3标注链霉亲和素

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CY3-Streptavidin

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