RhodamineB-PEG-Biotin,RB-聚乙二醇-生物素的合成策略
RhodamineB-PEG-Biotin,RB-聚乙二醇-动物素的制作而成思路
RhodamineB-PEG-Biotin 是一种双功能荧光标记生物素化合物,将高荧光强度的罗丹明B(Rhodamine B)、亲水性的聚乙二醇(PEG)链以及生物素(Biotin)三者有机结合。罗丹明B提供了稳定的红色荧光信号,具有较强的光稳定性和量子产率;PEG链作为柔性亲水间隔臂,有效提高了溶解性,减少了非特异性结合,并增加了生物素基团与受体结合时的可及性;生物素部分则与亲和配体链霉亲和素(Streptavidin, SA)之间形成高亲和性(Kd ≈ 10^-15 M)的结合,是常用的分子识别与标记单元。因此该分子应用于免疫标记、细胞成像、纳米探针修饰以及表面功能化实验。
其生成基本上进行日渐偶联攻略。首要在RhodamineB与PEG内用NHS酯-氨基不起作用或羧基-氨基缩合不起作用造成稳定性的酰胺键,有RB-PEG-NH2或RB-PEG-COOH里头体。陆陆续续用生态学素的催化活性具象化态学(如Biotin-NHS 或 Biotin-PEG-COOH)与PEG里头体不起作用,造成RB-PEG-Biotin。PEG身为拼接臂的大小可灵活多变管控,普通在PEG2k–PEG5k范畴内,既保持着水无水磷酸氢又确保安全生态学素服务器露出。在纯化工作方面,RB-PEG-Biotin 大多数所用到透析(MWCO原则PEG数值首选,如1–3 kDa)以清除小原子硫氰酸盐和未表现底物,接着随后可加上凝胶的作用过滤器层析(如Sephadex G-25)进十步清除什么是自由颜料。对高纯净度想要,还可所用到反相更高效液质色谱(RP-HPLC)破乳,依据太阳光的紫外线-可看得出光测试器在 555–565 nm 吸光度下监测器RhodamineB的功能消除峰。定量分析法律方式方法通常以及:① 紫外光-不难发现光光谱仪仪(UV-Vis),提示出RhodamineB的本质特征吸收的作用峰(约554 nm);② 荧光光谱仪仪,卫星发射峰地处570–590 nm,借以核验化学活化染料化学活化长期保持;③ 核磁震动氢谱(^1H NMR)和碳谱(^13C NMR),效验PEG与动物工程素的成功失败对接;④ 质谱(MALDI-TOF或ESI-MS),于氧分子量加测,核验PEG呈现度与完整版构成;⑤ SDS-PAGE 与荧光扫描仪扫描紧密构建,非常适于核蛋白标出的场景下核验动物工程素化荧光电极的紧密构建特效。所述,RB-PEG-Biotin进行光电器件与构成定量分析法律方式方法可被全面性效验,为事件调查的动物工程系统实验性给予信得过性。产品名称:RhodamineB-PEG-Biotin,RB-聚乙二醇-生态学素
饱和度:95%+遗传性状:固态物或固态存放标准:-20°C烘干遮光存有内包装规格为:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提拱)设备厂家:杏彩体育平台 微生物