RhodamineB-PEG-ConA，RB-聚乙二醇-刀豆球蛋白酶A的结合途径与步聚

RB-聚乙二醇-刀豆球蛋白A是一类典型的荧光标记糖结合蛋白复合物，其基本构成包括三个部分：荧光染料Rhodamine B（RB）、柔性间隔臂聚乙二醇（PEG）以及糖结合蛋白刀豆球蛋白A（Concanavalin A, ConA）。Rhodamine B为常见的罗丹明类荧光染料，具有高量子产率、强烈的可见光吸收（λ_abs≈550 nm）与发射（λ_em≈570 nm），且在水溶液和生物环境中稳定性良好。PEG片段作为疏水染料与亲水蛋白之间的柔性间隔基团，能够有效减少空间位阻与疏水聚集，同时提升复合物的溶解性与生物相容性。ConA是一种四聚体植物凝集素，具有特异识别α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基的能力，常用于糖生物学研究、细胞表面糖链探针及糖蛋白分离。通过在ConA上引入RB-PEG荧光标记，不仅保持其对糖基的结合活性，还赋予其荧光可视化功能，用于糖链成像、细胞识别和微阵列检测。

自动合成交通路线与布骤RB-PEG-ConA的分离纯化可构成这三个重点过程：①荧光有机染料RB与PEG链的无线连接；②带活力基团的RB-PEG衍生产品物的分离纯化；③RB-PEG与ConA的偶联。RB-PEG前体合成视频Rhodamine B氧分子结构往往包含羧基（RB-COOH），可凭借该羧基与氨基-PEG做出缩合现象。普遍的PEG隔断臂氧分子结构为氨基-PEG-NHS或氨基-PEG-甲酯。以RB-COOH与氨基-PEG为起讫物，参加EDC（1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺）和NHS（N-羟基琥铂酰亚胺）活性羧基，行成RB-NHS酯后面体。后来与氨基-PEG反映迟钝，形成RB-PEG-NH2或RB-PEG-COOH等具有催化活性末高端的荧光化PEG大分子。此过程需要无水DMF或DMSO中采取，并在惰性N2自我保护下反映迟钝，以避开油脂水解。物质可借助透析或柱层析纯化。RB-PEG活力化为以便险遭与营养物质质ConA偶联，需将RB-PEG还原成为特异性酯或包含的可与赖氨酸侧链氨基现象的模块基团。经常用的方法属于：将RB-PEG-COOH再度根据EDC/NHS纯化，转化成RB-PEG-NHS酯。或通过马来酰亚胺突显PEG链末梢，组成RB-PEG-MAL，应用于与淀粉酶巯基偶联。RB-PEG与ConA的偶联ConA蛋白质表层现实存在丰富多样的赖氨酸残基氨基（–NH2），可与NHS酯会出现酰胺键偶联。将纯化的ConA易溶PBS缓冲器液（pH 7.4），恢复蛋白质构象保持稳定。慢慢地加盟RB-PEG-NHS盐溶液，一般性在4 °C下轻柔搅伴不起作用数小时内，以免过快淡化影响活力性减退。凭借透析或疑胶过滤系统除去未不起作用的RB-PEG，能够RB-PEG-ConA。若便用马来酰亚胺方案，则可先对ConA做好巯基化处里（如用Traut’s实验试剂形成巯基），再与RB-PEG-MAL偶联。基本特征与应用软件终化合物RB-PEG-ConA为荧光糖紧密结合血清检测器，有下面作用：荧光使用性能出众：RB数据信息很强，适于显微显像和流式细胞术论文检测。空间结构软质与稳固性：PEG链降低蛋清表明淡化后的构象扰动，保证ConA的糖配合亲水性。特女性朋友相结合：仍能辨认多糖、糖蛋白质及肿瘤细胞外表面糖链。选用的范围广：可作于糖生物工程学分析、细胞质膜糖链激光散斑、糖基判断阵列、肿瘤药物递送体统中的糖靶向药物遮盖。利用合理安排结构设计PEG链长与RB标出占比，可在保证ConA催化活性的同時化荧光卫星信号，得到一项高迟钝度、非特异聊天的糖链探头。

产品名称：RhodamineB-PEG-ConA，RB-聚乙二醇-刀豆球核蛋白A

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