Sulfo-Cy5-IA,磺酸 Cy5 碘乙酰胺的应用领域
概述
Sulfo-Cy5-IA是一种以磺酸化Cy5为基础的荧光标记试剂,末端含有活性碘乙酰胺基团(IA)。其激发波长约为649 nm,发射波长约为666 nm,属于远红光区域。碘乙酰胺基团能特异性与蛋白质或多肽中的巯基(–SH)共价结合,实现高选择性标记。磺酸化结构增强水溶性,使其在水性溶液中稳定且易于操作。
应用领域
Sulfo-Cy5-IA广泛应用于蛋白质标记、酶学研究及荧光成像实验。它可用于巯基残基定量标记、蛋白质结构研究、蛋白质相互作用分析及多通道荧光成像。其远红荧光特性降低了样品自发荧光干扰,适合与其他颜色荧光染料组合,进行多重标记实验。此外,该试剂可用于流式细胞分析、共聚焦显微镜及Western blot等实验。
操作优势
Sulfo-Cy5-IA具有信号亮度高、光稳定性好、水溶性佳的特点。磺酸化结构使其无需有机溶剂即可直接在水溶液中使用,操作简便。其碘乙酰胺活性可实现高选择性巯基标记,减少非特异性结合,同时远红光信号便于多通道荧光成像。
使用注意事项
在使用Sulfo-Cy5-IA标记蛋白质时,应控制染料与巯基摩尔比,以避免过量染料导致蛋白质结构改变或背景信号增加。标记后需去除游离染料,可通过透析、凝胶过滤或离心柱分离。染料应避光、低温保存,防止光漂白及降解。活细胞实验中需注意远红光激发条件,以保证信号稳定且细胞损伤最小。
总结
Sulfo-Cy5-IA结合了Cy5的远红光荧光性能和碘乙酰胺的巯基特异性,提供稳定、亮度高的荧光标记方案。其水溶性和操作便捷性,使其在蛋白质研究、荧光成像及多通道分析中成为常用的科研试剂。