CAS:510758-23-3
5 - 羧基荧光素叠氮化物(CAS 号 510758-23-3)是 5 - 羧基荧光素建立叠氮基(-N₃)确立的荧光探头,目标职能是采用弹窗化学式发应(CuAAC 或 SPAAC)图标含炔基的微动物原子核,广在核酸图标、核氨基酸示踪及神经组织细胞微动物学调查。原子核性质上,5-FAM 人体诠释其强荧光特点 ——494nm 激活、518nm 发射点,荧光量子成品率约 0.79,在 pH5.0-9.0 区间内荧光表现维持;叠氮基表面积小、发应特喜欢的人高,与炔基发应确立维持的三唑环,且不与微动原料内常见的官能团(氨基、巯基)发应,对微动物原子核活性酶不良影响直积;的同时,该探头水溶水性好些(生理性保护液中溶水度约 80μmol/L),满足离体与活神经组织细胞研究。
制取的过程 需期重视叠氮实用性性与异构体色度:以 5-FAM 为原石,来羧基纯化(如导出 NHS 特异性酯)后与叠氮乙胺发应,引用叠氮基。发应需要排风系统橱中来(不要叠氮化物析出),严格的保持发应体温(0-10℃),避免叠氮基拆分;纯化选用反相 HPLC(分子运动相为乙腈 / 水),转移 6 - 异构体与未发应原石,确定产品色度≥98%;来红外光谱图(IR)确认叠氮基特殊性峰(2100 cm⁻¹ 差不多),并来安稳性测式(37℃孵育 24 一小时,叠氮基留下率≥95%)确定实用性施用。
采用场合遍及多类生理学制品碳原子符号:在核酸符号中,可借助 CuAAC 想法符号含炔基的 DNA/RNA 查重器,应用在荧光原位混种杂交(FISH)实验设计,查重染料剂体异样(如唐氏总体征的 21 号染料剂体三体),荧光数据信息强且背景图低;在蛋清质示踪中,可符号含炔基的并购重组蛋清,借助荧光查重分析一下蛋清在上皮生殖上皮肿瘤細胞内的体现与固定,如符号 GFP 整合蛋清,洞察分析其在上皮生殖上皮肿瘤細胞器中的分布不均;在上皮生殖上皮肿瘤細胞生理学制品学分析中,可借助 SPAAC 想法符号活上皮生殖上皮肿瘤細胞内涵炔基的脂质,定位跟踪脂质在上皮生殖上皮肿瘤細胞膜上的分子运动时延,分析上皮生殖上皮肿瘤細胞膜的分子运动性转变;前者,还可应用在中药建立,符号含炔基的侯选中药,借助荧光数据信息监测数据中药与靶点蛋清的融合情况发生,为中药活性氧评价指标出示效率查重手法。
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