5-FAM Me-tetrazine（CAS 号 1619222-85-3，5 - 羧基荧光素甲基四嗪）是 5-FAM - 四嗪的甲基充当衍生态学物，基本优劣势而言甲基掩盖减弱了四嗪基团的可靠性（削减淀粉水解传输速度），时调取高效益 IEDDA 体现抗逆性，采用于长时程生态学氧原子示踪、活体显像及多箭头工作室。氧原子功能上，其荧光能与 5-FAM 同样 ——494nm 增加、518nm 使用，荧光量子产出率约 0.77，且甲基的引用未发生变化荧光团的电子光学功能；甲基四嗪基团与 TCO 的体现传输速度虽稍低一些于各种类型四嗪（约 10⁵-10⁶ L/(mol・s)），但可靠性取得增加（在生理特点降低液中半衰期减少至 24 个H上面的），更適合需长时期孵育的工作室（如神经元养育 72 个H上面的的侦测）。
备制操作过程需注重质量甲基四嗪引进与物品饱和度：以 5-FAM 为工业奶茶原料，确定含甲基四嗪结构的的接触臂（如甲基四嗪丙胺），根据 EDC/DMAP 催化剂的作用的酰胺缩合表现偶联。表现气温操纵在环境温度（25℃），表现日子 2-4 小的时候，防范较高温度诱发甲基四嗪转换；纯化阶段性主要采用反相 HPLC，按照严格操纵冲洗掉系数，有效加强组织领导分離清理 6 - 异构体与未表现工业奶茶原料；物品需根据高效化色谱仪色谱 - 质谱联用（HPLC-MS）效验饱和度（≥98%），并根据平稳性测试软件（37℃生理上储存液中孵育 24 小的时候，荧光的强度删去率≥90%）有效加强组织领导性能指标。
利用上更比较合适长时程与多图标测试：在干受损神经内部探测中，可图标含 TCO 的干受损神经内部，依据荧光成相关察干受损神经内部在小动物身机体 7 天左右的定植与两极分化历程，甲基四嗪的增强性尽量避免了测试测试探针早点失灵；在多色成相中，甚为荧光移动移动信号与别的颜料（如 Cy3、Cy5）无交叠，可与别的 IEDDA 测试测试探针（如 Cy3-TCO）答配，达到同个受损神经内部内几种生物技术原子核的还示踪；在抗癫痫类药剂量分泌探析中，可图标含 TCO 的抗癫痫类药剂量原子核，依据荧光判断研究抗癫痫类药剂量在身机体 24 小的时候内的分泌速度与除掉方法，为抗癫痫类药剂量半衰期风险评估可以提供资料；除此之外，还需用于固定好受损神经内部的免役荧光测试，甲基四嗪的增强性为了确保了测试历程中移动移动信号长盛不衰减，的提升最后连续性。
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