荧光素(Fluorescein)与异硫氰酸荧光素(FITC,CAS 号 518-45-6)是三类关系密切相应的的荧光纺织染料,往往是到母体荧光团,后面是荧光素的异硫氰酸酯衍生产品物,重点使用用途均过活物大大大大分子式标上,常见用来天然免疫介绍、肿瘤细胞影像及大大大大分子式动物技术学科学研究。大大大大分子式性上,荧光素本身就享有强荧光 ——494nm 调动起、518nm 使用,荧光量子劳动生产率高(约 0.92),水无水磷酸氢好,但其缺少特情人反响基团,标上APP限制;而 FITC 在荧光素的 5 位(或 6 位,为搅拌物)注入异硫氰酸基团(-NCS),该基团可与动物技术大大大大分子式的氨基(-NH₂)特情人反响构成相对稳定的硫脲键,反响状态平稳(pH8.0-9.0,恒温),且不会影响动物技术大大大大分子式化学活化,并且恢复荧光素的成绩突出荧光能力,是现如今APP最常见的荧光标上生化试剂中之一。
备制方便,荧光素可完成邻苯二甲酸酐与间苯二酚在浓硫酸钠促使下缩合而成,发应需掌握温(180-200℃)与发应时刻(4-6 1天),以免 氢氟酸处理;FITC 则以荧光素为化学原料,完成与硫光气(CSCl₂)发应转化异硫氰酸基团,发应要在无水前提下对其进行(以免 硫光气油脂水解),新线路遮光(以避免荧光素光解),发应后用于柱层析(透明硅胶柱,洗刷剂为氯仿 / 甲醇)纯化,清理未发应荧光素,连用分光光度计分光光度计法测色度(A495/A280 相对分子质量≥0.9)。
用途上这两种各是偏重:荧光素故有水无水磷酸氢好、渗透性低,惯中用活体荧光激光散斑 —— 随后当做造影剂中用小鼠胃中肺部肿瘤的固定;FITC 则包括中用动物原子核标示,在免疫系统荧光检侧设备中,可标示抵抗能力、抗原或二抗,中用要求原子核的固定与化学发光法 —— 随后标示抗 CD4 抵抗能力,检侧设备 T 肿瘤神经组织内部表层 CD4 原子核的把你想理解出来;在肿瘤神经组织内部激光散斑中,可标示肿瘤神经组织内部骨架蛋清(如肌动蛋清)或肿瘤神经组织内部膜多巴胺多巴胺受体,观察动物肿瘤神经组织内部特征变迁或多巴胺多巴胺受体轉運;在原子核动物学试验中,可标示核酸测试探针,中用原位杂交种试验,检侧设备单一什么是基因的把你想理解出来;不但,FITC 还密切中用普鲁士蓝染色肿瘤神经组织内部术,当做荧光标示制剂完成肿瘤神经组织内部的分选与签别,是我的生命科学课试验中不可以或缺的基本知识设备。
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