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FITC-Neuropeptide S,荧光素标记神经肽的合成步骤
发布时间:2025-09-09     作者:axc   分享到:
FITC-Neuropeptide S,荧光素标记图片脑神经肽的制成布骤

FITC-Neuropeptide S是一种将异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)共价标记至神经肽Neuropeptide S(NPS)的小分子荧光衍生物。Neuropeptide S是一种由20个氨基酸组成的内源性神经肽,具有独特的受体结合特性,其活性序列通常以特定的N端或赖氨酸残基为标记位点。通过FITC标记,NPS获得绿色荧光(激发约495 nm,发射约520 nm),可用于体外或细胞体系的可视化示踪、受体结合分析及动力学研究。FITC-Neuropeptide S结合了荧光示踪功能与神经肽的生物活性,是神经科学及药物递送研究的重要工具。

FITC-Neuropeptide S的制作而成流程常见涉及中枢神经肽固相制作而成、荧光符号相应纯化和表现4个重中之重时期:Neuropeptide S的固相炼制(SPPS)再生利用Fmoc(9-芴甲氧羰基)政策,在固相平台(如Rink Amide或Wang硅胶粘合剂)上进一步连通肽链。每步利用Fmoc呵护的胺基酸与纯化剂(如HBTU、HATU或DIC/HOBt)缩合,确立肽键,一起利用碱性食物经济条件(如哌啶)脱去Fmoc呵护基。达到全部肽链蔓延后,完成呈酸性状态(如TFA)从光敏树脂上裁割肽链,并且的还原侧链保护好基团,有带自由度氨基的Neuropeptide S。荧光记号(FITC偶联)将缺水的NPS析出于不宜缓存数据液(如0.1 M碳酸氢钠缓存数据液,pH 8.0–9.0), 保障N端或赖氨酸侧链氨基未质子化以维系亲核可溶性。FITC互溶少量的DMSO或碳酸盐抗震液中,遮光保护的。变慢融入FITC盐溶液,使FITC的异硫氰酸基团(–N=C=S)与肽氨基突发亲核加持想法,绘制安全的硫脲键(–NH–C(=S)–NH–),控制共价偶联。化学反应在环境温度或底温情况下展开2–12分钟,减少荧光团可降解,同时保障图标错误率。结束想法与纯化可以通过融入甘氨酸或氨水中止任何多余FITC的反馈。再生利用高效能高效液相色谱(HPLC)通过纯化,祛除未反應的FITC、多肽溶物及副乙酰乙酸。纯化后的FITC-Neuropeptide S能够 质谱(MS)、HPLC及UV紫外线-看得见光光谱仪核实碳原子量、饱和度及荧光特征参数,维持货物的功能模块全面性。在自动合成操作过程中,要要严格管控的反应水平:pH形成在弱典型的含碱以提高氨基渗透性,以免多肽格局解离;温湿度与阳光照射管控以防止止荧光团分解;FITC与NPS摩尔比seo以兑换单标注,还保持肽的微生物渗透性。使用适当合理的选择标注位点(N端或赖氨酸残基),可抓好肽的感觉运用力量没受作用。终受到的FITC-Neuropeptide S更具安稳的绿色环保荧光和可以操控的图标强度,能用的 于周围感觉神经末梢肽多巴胺受体结合实际分析一下、细胞膜内递送示踪、荧光成相及性药物筛分等探析。其硫脲共价键保持了图标安稳性,而选择的周围感觉神经末梢肽编码序列保持了特喜欢的人微菌物活力,使其为周围感觉神经末梢小学科学和微菌物理学实验报告中效率稳定的荧光平台。

产品名称:FITC-Neuropeptide S,荧光素标记符号面神经肽

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FITC-Neuropeptide S

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