DMPE-CY7.5,CY7.5标记二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱的表征方法
DMPE-CY7.5,CY7.5标签二肉豆蔻年华酰磷脂酰胆碱的研究步骤步骤
DMPE–Cy7.5 是一种将二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE, 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine)与近红外荧光染料 Cy7.5 通过共价键结合得到的两亲性荧光探针。其分子具有典型的三部分结构:① 双 C14 饱和脂肪链,赋予其稳定的膜锚定能力;② 磷脂酰乙醇胺头基,提供伯胺官能团作为反应位点;③ 近红外荧光染料 Cy7.5,吸收峰约 780–790 nm,发射峰在 800–820 nm,光稳定性与组织穿透性更优于 Cy7,因此非常适合用于深部活体成像。由于脂质骨架与荧光团之间为共价酰胺键连接,产物具有的结构稳定性与抗淋洗特性,能够在复杂生物环境中保持持久荧光信号。
分解成自驾线路关键忽略于 DMPE 氨基与 Cy7.5 活性酶酯(经常为 Cy7.5–NHS ester)期间的酰胺化响应。响应关键技术为伯胺最为亲核微生物培养基抢攻 NHS 酯中的羰基碳,转为酰胺键并发挥 N-羟基琥铂酰亚胺(NHS)副物品。该响应兼具高选取性和提高错误率率,不要了染色剂非特情人体现。响应需到无水、弱碱性食物必要条件下实施,以始终维持 NHS 酯的热稳定性处理高性和有助于酰胺键构成。合出步凑可慨括为这几个部分:主要原料预备:将 DMPE 脱水怎么办烘干后融掉在无水氯仿/甲醇或 DMF/氯仿的混杂高沸点溶剂中。Cy7.5–NHS ester 则融掉在几瓶无水 DMSO 或 DMF 中,需现配在用以以免淀粉水解。的体现去:在惰性氢气或氩气维护下,按摩一下尔比 DMPE:Cy7.5–NHS = 1:1.2–1.5 混杂,成为一定量可挥发碱(如 DIPEA 或 TEA),遮光前提条件下在常温搅拌装置 8–16 分钟。的体现时候中,Cy7.5 的长共轭链是不会应响伯胺与活力酯的缩合成功率。症状做好:利用薄层色谱(TLC)或质谱监测方案症状速度。当游离态的 Cy7.5–NHS 需要量彻底,且模式内一般为目标值结果时,症状只能撤销。纯化具体步骤通常情况下用到准备型 HPLC 或硅胶制品柱层析:在大投资额制成,常选用反相配制型 HPLC,以水/乙腈或水/甲醇为流相,并含 0.05–0.1% TFA 或甲酸以调理峰形。因为 DMPE–Cy7.5 极其疏水,其洗刷时间段普通晚于散布 DMPE 和有机染料。谈谈调查室小建设规模化学合成,也可使用矽胶柱层析,纯净水相为氯仿/甲醇/水的混合物指标体系,调数量以控制 DMPE–Cy7.5 与副货物的更好离心分离。定性分析办法涉及:UV–Vis 释放的作用光谱分析:在 780–790 nm 观测到 Cy7.5 的有特点释放的作用峰,根本纺织染料构建。荧光光谱图:在 800–820 nm 范围之内内加测到反射峰,验证通过其近红外会发光性能参数。质谱(ESI-MS 或 MALDI-TOF):验证大分子量符合要求 DMPE 与 Cy7.5 耦合电路代谢物的理论与实践值。¹H NMR 和 ³¹P NMR:用到查重磷脂骨架的全部性及其氨基成功的英文转变成为酰胺的的结构特性。HPLC 饱和度介绍:化合物饱和度需不超 95%,确保安全生产其放前续激光散斑或膜放到科学试验中的稳定可信性。DMPE–Cy7.5 的构思使其既具脂质分子结构的膜锚定性能,又提供近红外窗子下的高效能荧光无线预警。在用中,它普遍于脂质体或納米平台的标签,易于产品定位跟踪脂质体在内部的分布图制作与新陈代谢工作;直接也应用于为膜测试探针应用于细胞质膜标签和膜淀粉酶的产品定位论述。与 Cy7 或 Cy5 等短主波长有机染料相对比,DMPE–Cy7.5 在内部三维成像中时代背景无线预警更低、穿过纵深较大,可建立更灵敏性和比较高的分数辨率的产品定位跟踪。产品名称:DMPE-CY7.5,CY7.5标记符号二肉白芷酰磷脂酰胆碱
溶解度:95%+遗传性状:固态垃圾或固态储放环境:-20°C干躁背光另存纸盒包装的规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需给予)厂商:杏彩体育平台 动物