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AF350-Annexin V,Alexa Fluor350 标记膜联蛋白 V
发布时间:2025-09-03     作者:HLL   分享到:
护肤商品编码称:AF350-Annexin V,Alexa Fluor350 箭头膜联蛋清 VAF350-Annexin V 是菌物技术药学科研当中适于癌神经元凋亡在线检测的特男人荧光测试探针,由膜联血清 V(Annexin V)与 Alexa Fluor 350(AF350)荧光染剂确认共价偶联养成,推动 Annexin V 对磷脂酰丝氨酸(PS)的高感染力组合特点,组合 AF350 特点的海蓝荧光4g信号,做到对癌神经元凋亡流程的精准扶贫区分与进行分析,特别是适适于于多色荧光共标记图片检测,在癌神经元菌物技术学、肉瘤学、药理学学等层面运用诸多。


1,总结膜联血清 V(Annexin V)的主导怪物学效果 —— 看做钙根据性磷脂联系血清,其在 Ca²⁺的存在下可特喜欢的人联系人体神经肿瘤内部核上的磷脂酰丝氨酸(PS),而 PS 外翻(从人体神经肿瘤内部核后侧到侧部)是人体神经肿瘤内部凋亡旱期的标志图案牌性的事件,这样特质使 Annexin V 称得上凋亡检则的 “分子式靶向疗法的质粒载体”。与的凋亡检则标志图案牌物(如 Caspase 产甲烷、DNA 场面描写化)相比之下,PS 外翻会发生周期更早(凋亡启用后 30 分钟的时间内可以了造成),且有着角度特喜欢的人,不容易受人体神经肿瘤内部体血细胞坏死等的人体神经肿瘤内部消失的方法的干扰信号,如此以 Annexin V 为的质粒载体的测试探针,是检则旱期凋亡的志向交通工具。AF350-Annexin V 中的 Annexin V 一般而言为主组表达方法出的 Annexin A5(最喜欢用的亚型),根据什么是基因工程施工技術在原核人体神经肿瘤内部(如直肠杆菌)中表达方法出纯化,有着纯度就越高(>98%)、活性氧稳固、批号间区别小的特点,确保与 PS 联系的特喜欢的人与感召力(解离常数 Kd 约为 10⁻⁹ M,都是高感召力联系)。


首先其次,Alexa Fluor 350(AF350)是该电极的荧光数据因素,归属天暗淡黄色荧光有机活性纺织活性有机染料,其光学玻璃特质所经网站优化,专为食物子样本标签设计的。AF350 的最高调动起光谱剖析图约为 346 nm,最高选用光谱剖析图约为 442 nm,选用透亮的天暗淡黄色荧光,与荧光显微镜的 DAPI 滤光片系統(或专属UV紫外线线光调动起滤光片)性能良好的,以及科学试验运营。有别于于中国老式天暗淡黄色荧光有机活性纺织活性有机染料(如 DAPI、Hoechst 33342),AF350 更具同质性特色:首先是荧光量子劳动生产率较高(约 0.45),在低电极有机废气浓度下才可以产生可检验的天暗淡黄色荧光数据,有效降低电极摄入量,抑制对活細胞的因素渗透性(如UV紫外线线光光成脂的細胞直接损伤);二要抗光固色意识较弱,即便天暗淡黄色荧光有机活性纺织活性有机染料年轻化因调动起光能量消耗较高(UV紫外线线光光)而诱发生光固色,但 AF350 根据电学架构淡化(如引用相对增强基团),其光固色传输速率较中国老式有机活性纺织活性有机染料(如荧光素)有效降低约 30%,可满足需要远期动态性洞察剖析科学试验(如 30-60 20分钟的凋亡流程监测站);三是光谱剖析图隔离度好,AF350 的选用光谱剖析图与翠绿色(如 AF488)、网红(如 AF594)荧光有机活性纺织活性有机染料的重合度过低(重合常数<0.05),这个特质使其拥有多色荧光共标签科学试验的好首选 —— 举列,可一起选用 AF350-Annexin V(标签凋亡細胞)、AF488 - 抗 Caspase-3 抵抗能力(标签纯化的 Caspase-3)、AF594 - 线粒体电极(标签线粒体),在有所不同生理盲点下洞察剖析凋亡細胞的 PS 外翻、Caspase 纯化与线粒身型态改变,控制多关键点凋亡体系剖析;四是 pH 相对增强性最号,在 pH 4.0-8.0 范围内内,AF350 的荧光的强度变化小于等于 10%,没有細胞内溶酶体(咸性自然环境)或細胞质(碱式盐自然环境)pH 差别的的的影响,保证有所不同細胞部位荧光数据的可靠性性。


在生物学偶联准备上,AF350 通畅以灵活力酯(如 NHS 酯)状态与 Annexin V 偶联,不良响应机制与相关 Alexa Fluor 纺织染色剂像 ——AF350-NHS 酯的灵活力基团(N - 羟基虎珀酰亚胺酯)可与 Annexin V 碳原子上的氨基(主要的来自于赖氨酸残基的 ε- 氨基)发生酰胺化不良响应,出现相对稳定的 C-N 共价键,将荧光纺织染色剂与淀粉酶酶质接连。偶联阶段需严格要求掌握以内数据:二不良响应 pH,能维持在 7.2-7.5(应用 PBS 缓解液),防范 pH 过高出现抵抗能力变形或 pH 过低影响力 NHS 酯灵活力;二摩尔此例怎么算,AF350 与 Annexin V 的摩尔比通畅为 2-3:1,一种此例怎么算可在确定荧光的强度的同一,防范太多纺织染色剂碳原子遮蔽 Annexin V 的 PS 搭配位点(Annexin V 的 PS 搭配位点含几个旋光性氨基,太多纺织染色剂有可能实行疏水用处不影响其结构特征);三是不良响应时间间隔与温湿度,环境温度(20-25℃)孵育 1-2 半小时,防范高温度出现淀粉酶酶质变形。偶联做完后,需实行凝胶的作用实行过滤层析(如 Sephadex G-25 层析柱)快速清理未偶联的散布 AF350—— 散布纺织染色剂会出现非特异形荧光预警,不影响检查导致;同一,应用 Bradford 法或紫外线 - 可看见分光光度计判断淀粉酶酶质质氨水浓度,以保证终有机物中 Annexin V 的质氨水浓度合乎实验室具体需求(通畅为 0.1-1 mg/mL)。因此,还需对终有机物实行质验正:实行免疫印迹癌体生殖生殖受损肿瘤细胞核术检查,验正 AF350-Annexin V 对凋亡癌体生殖生殖受损肿瘤细胞核的标注学习效率(与求该凋亡引导剂解决的癌体生殖生殖受损肿瘤细胞核孵育后,抗体阳性癌体生殖生殖受损肿瘤细胞核此例怎么算应>80%);实行荧光显微镜洞察分析,核实荧光预警汇集在癌体生殖生殖受损肿瘤细胞核膜外面(最早的时候凋亡癌体生殖生殖受损肿瘤细胞核),无清晰癌体生殖生殖受损肿瘤细胞核内弥散预警(解决纺织染色剂信息泄露或淀粉酶酶质变形)。产于:宝鸡金桥铜业跨接线的截面积大小:50mg 100mg 500mg纯净度:95%程序:固体颗粒/碎末存放能力:要在冷藏室保存温情系统提示:仅适用做教学科研,不可能适用做机体实验性!昆明杏彩体育平台 生物学自动化信息有局限平台就是家集研发管理,种植,销量为一体化的高自动化信息公司企业,可带来自动合成磷脂、100原子结构聚乙二醇并发展品物学、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁块奈米科粒、奈米金及奈米金棒、近红外荧光颜料、生物荧光颜料、荧光标志的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白酶热塑剂、小原子结构PEG并发展品物学、弹窗化学物质设备、枝条状缩聚物、环糊精并发展品物学、大环配体类、荧光量子点、无色质酸并发展品物学、石墨稀或腐蚀石墨稀、碳奈米管、富勒烯这些等等,能够充分满足不同的买家的设计的需求。

AF350-Annexin V

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