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AF594 Concanavalin A,Alexa Fluor594 标记刀豆蛋白 A
发布时间:2025-09-03     作者:HLL   分享到:
商产品各称:Alexa Fluor594 标出刀豆蛋白酶 A

英文名称:AF594 Concanavalin A

AF594 Concanavalin A(Alexa Fluor594 记号刀豆球蛋白质 A,英文缩写 AF594-ConA)是一种类将荧光染剂 Alexa Fluor594(AF594)与刀豆球蛋白质 A(Concanavalin A,ConA)达成无机化学偶联出现的功能模块模块性怪物电极,其重点功能模块模块是运用 ConA 对指定蛋白质的特异形通过的能力与 AF594 的荧光该报告性能特点,达成对怪物范例中 α-D - 珠露糖、α-D - 匍萄糖下列不属于衍怪物的荧光市场定位与检侧,广泛性技术应用于神经元怪物学、微怪物学、病理学学等范畴的糖基化科研、神经元膜设计浅析及病源体判断等工作。


第一方面,刀豆蛋清 A(ConA)看作一种生活本身值物凝集素,是该探头改变糖元靶向药物切合的核心区引擎。ConA 来原于刀豆(Canavalia ensiformis)迅雷链接,其碳原子结构式组成部分为四聚体(碳原子结构式量约 102 kDa),每一位亚基均含有块个特情人的糖元切合位点,也能与 α-D - 甘霖糖、α-D - 匍萄糖及寡糖双重性物(如甘霖聚糖、葡聚糖)遭受高强度特情人的非共价切合,切合吸引力强(解离常数 Kd 基本上在 10⁻⁶-10⁻⁷ mol/L 区域),且受不到别的通常糖元(如 β- 半乳糖、白砂糖、单糖)的干挠。各种糖元切合特情人是 ConA 不同之处于别的凝集素(如麦胚凝集素 WGA,特情人切合 N - 乙酰葡糖胺与口水酸)的要点,使其作为调查蕴含 α- 甘霖糖 / 匍萄糖糖链的微生物碳原子结构式(如糖蛋清、糖脂)的理想型软件。因此,ConA 的切合的时候体现了可逆转性,可完成在指标体系里添加入量过大的 α- 甲基甘霖糖苷(α-MM)竞争与合作切合位点,改变切合与解离的调节作用,一项性质在各式各样调查(如糖链的内化的时候观测)中体现了重要性实际价值。


而后,Alexa Fluor594(AF594)用作荧光意见书基团,为测试探针提高了出众的光学元件业务能力。AF594 是指红光光谱图仪荧光活性颜料,其最高程度增强光谱图仪约为 590 nm,最高程度发光谱图仪约为 617 nm,该光谱图仪的荧光在微菌物影像中都具备着正相关优势与劣势:1立方米面,红光的可吸收能力业务能力不弱,也可以合理有效可吸收能力很厚的微菌物模板(如团队切成片、3D 体癌生殖细胞核球),可以减少模板对光的吸收能力与散射,符合于深处团队的影像探讨;另1立方米面,微菌物模板(如体癌生殖细胞核、团队)自身的的自行荧光在红光光谱图仪极弱,也可以最高程度可能大幅度降低蓝本预警不干扰,正相关升级影像的信噪比,越发适于对低丰度糖链的检查。因此,AF594 都具备着越高的荧光量子产出率(约 0.6)和优秀的光不稳确定性,不同点于传统意义的红光活性颜料(如 Cy3、罗丹明类),其在长时二氧化碳激光射进来的角下难以突发光漂白剂,也可以拥有活体癌生殖细胞核最新影像、长时跟踪糖链布局变动的实践所需,举列在看体癌生殖细胞核的的表面糖链的内吞的过程或螨虫的的表面糖基的最新表达爱时,可有效确保数个钟头内荧光预警的不稳确定转换。也,AF594 的荧光光谱图仪与另一选用荧光活性颜料(如绿光 AF488、蓝光 DAPI)的光谱图仪重重叠叠度低,符合于多色荧光影像实践,可也标记图片碳水化合物与另一微菌物分子式(如血清质、核酸),达成几组分的共精确定位探讨。


从无机化学工业上偶联工序看下,AF594 与 ConA 的偶联需充分考虑荧光安全性能与凝集素灵活性的提取。应该说来按照 NHS 酯偶联法:AF594 根据无机化学工业上体现传入 NHS 酯基团(AF594-NHS),该基团可与 ConA 原子核中赖氨酸残基的伯氨基(-NH₂)有特情人不良症状,组成长期保持的酰胺键(-CONH-),满足荧光活性活性纺织纺织染料与凝集素的共价连接方式。偶联过程中中需要严设定不良症状情况(如 pH 值 7.2-8.0、低温、不宜的活性活性纺织纺织染料与 ConA 摩尔比),以以以保证 之下2个方面:一方面防范 ConA 的糖原类相结合起来实际位点因无机化学工业上体现而降解,应该说来根据预实验英文性优化调整摩尔比(应该为 5:1 至 15:1),限制活性活性纺织纺织染料原子核对相结合起来实际位点的个人空间位阻或光学现象印象;第二是防范 ConA 过度的标注符号诱发的汇聚或溶水性减低,规模经营的标注符号容重(应该说来每一位 ConA 四聚体相结合起来实际 4-8 个 AF594 原子核)可在以以保证荧光刚度的时候,长期保持 ConA 的天然水四聚体构成与水溶解性。偶联来完成后,需根据凝露脱水层析(如 Sephadex G-25 柱)出掉未不良症状的分散 AF594,以以保证 测试探针的溶解度,防范分散活性活性纺织纺织染料的底色荧光干扰信号实验英文性结局。

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AF594 Concanavalin A

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