CY7-reactive-protein,CY7标记反应蛋白的反应机理
CY7-reactive-protein,CY7标识现象核蛋白的现象原理
CY7-reactive-protein 指通过共价键将近红外荧光染料 CY7 与蛋白质偶联的荧光探针。常见的标记策略是利用蛋白表面存在的亲核基团(赖氨酸残基上的 ε-氨基,或半胱氨酸残基上的巯基)与活化的 Cy7 衍生物(如 Cy7-NHS 酯、Cy7-马来酰亚胺、Cy7-DBCO 等)发生特异反应。这样得到的 CY7-蛋白共轭物不仅保持了蛋白的结构与功能,还具备近红外成像能力。该类荧光标记蛋白应用于细胞膜受体成像、蛋白运输研究、分子相互作用检测以及生物正交化学体系中的探针设计。由于 CY7 信号穿透深、背景低,因此特别适合在活体条件下进行蛋白动态追踪。表征方法包括 SDS-PAGE 荧光检测、紫外-可见吸收(A280 与 A750 校正计算标记度)、质谱与功能学实验。
表现原理赖氨酸记号(NHS 酯条件)CY7-NHS 酯在碱性食物條件下(pH 8.3–8.6)可被核蛋白接触面的赖氨酸 ε-氨基或 N-端氨基普攻。基理为:氨基的孤对电子为了满足电子时代发展的需求,伤害纯化的羧酸酯羰基,养成四面八方体其中体,转而减少 NHS 正离子,出现增强的酰胺键。的优点:的操作简单,可于于部分蛋清。有缺陷:图标位点不唯独,易有生多点儿呈现,干扰核蛋白特异性。半胱氨酸符号(马来酰亚胺有效途径)CY7-马来酰亚胺可与血清中的巯基借助 Michael 减伤反应迟钝共价依照。原理为:半胱氨酸巯基在弱酸性–弱典型的含碱状况下(pH 6.5–7.5)大部分解离成硫负阴阳离子,攻占马来酰亚胺双键的 β-位碳,生成保持稳定的硫醚键。的特点:首选性好,只标记图片裸露的半胱氨酸。优点缺点:依靠球蛋白半胱氨酸数量统计与地方地方。生物制品正交记号(SPAAC 或 IEDDA)若血清先经由隐性基因商品编号或物理化学呈现对接叠氮基(–N3)或四嗪基团,可再生利用 Cy7-DBCO 或 Cy7-四嗪做铜随心所欲点击量作用。SPAAC(应力应变有利于促进叠氮-炔环增益):DBCO 高表面张力环炔与叠氮基组织化环增益,变成 1,2,3-三氮唑共价键。IEDDA(逆电子设备实际需求狄尔斯–阿尔德):四嗪与力值二烯烃(如 TCO)飞速偶联。长处:选取性极低,对氨基酸等残基无干预,很大更适合活体标记图片。总体探讨CY7-reactive-protein 的响应差向异构其实质是灵活运用 CY7 衍动物物上的渗透性官能团与淀粉酶质普遍官能团两者之间的共价响应。NHS 酯–胺酰胺化是普遍攻略,最合适大多都数淀粉酶;马来酰亚胺–巯基响应可以提供高挑选性;而 SPAAC 与 IEDDA 响应代表性了一流的动物正交标注途径,选代替体內大环境。挑选哪几种标注途径需按照其淀粉酶材质、计划应用和需要备考位点挑选性来判断。产品名称:CY7-reactive-protein,CY7标出不良反应核蛋白
溶解度:95%+物理性质:物质或药液贮藏必备条件:-20°C空气干燥阴凉另存包装袋产品规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需带来)厂家代理商:杏彩体育平台 海洋生物