CY7-mannose,CY7甘露糖的表征方法
CY7-mannose,CY7杨枝糖的定性分析方式方法
CY7-mannose(CY7-甘露糖)是将近红外染料Cyanine7与甘露糖通过化学连接臂偶联得到的糖-染料偶联物,兼具CY7的近红外光学特性与甘露糖的识别功能,常用于甘露受体介导的细胞摄取研究、糖-蛋白相互作用与生物成像研究。合成通常选择既保留甘露糖末端还原性位点又便于水相反应的策略,比如“还原性末端-胺化”或“点击化学”两条主路线。
路线地图A(恢复备份成性后部-胺化 + 酰化):先将D-珠露糖用短链胺-PEG(如 NH2-PEGn-OH)在温文尔雅酸碱性或碱式盐要求下参与恢复备份成性胺化(NaBH3CN 算作恢复备份成剂,pH 5.0–6.0,在常温至37 ℃,数小时左右),合成珠露糖-PEG-NH2 间体;其次在无水或水/有机酸比调溶液中使用 CY7-NHS(或 CY7-活性酯)与珠露糖-PEG-NH2 体现(pH 7.5–8.5,在常温,30–120 min,遮光),变成不稳的酰胺键,能够CY7-PEG-mannose。该法位点确定性好、要求温文尔雅,合适水相生相克物大分子。途径B(糖基化-炔/叠氮 + CuAAC/SPAAC 超链接):先将珠露糖注入作用化端部(如转化成 propargyl-mannose 或 azido-mannose),可经由糖的醇羟基与碳酸二亚胺或 p-Nitrophenyl carbonate 演变成碳酸酯连结到短PEG-链并注入炔基/叠氮;之后用 CY7-azide(或 CY7-alkyne)在水相或水/有机质交织溶液中以 CuAAC(运行一少部分 Cu(I)/崔化剂与配体)或更温暖的 SPAAC(CY7-DBCO 与 azido-mannose,无铜)经济条件下来进行超链接不起作用,转为连结牢固性的三唑或 SPAAC 加上物品。此法位点可调、物品纯度更高,但若用铜崔化需后继非常严格除铜。纯化标准流程:发生反应成功后先用乙腈或甲醇配制并离心力快速清理沉积,后来分为透析(MWCO 1–3 kDa 视PEG粗度)或反渗透性和装置(Amicon)快速清理小原子核钙镁离子与游离子染剂;若产品较小或需要较高纯化,则分为反相科学规范色谱仪色谱(RP-HPLC,C18柱,乙腈-水均值,含0.1%甲酸或三氟乙酸)分开,再生利用750 nm处的近红外挥发峰与254/280 nm处的糖或PEG挥发来双从判断并抽取关键峰。对太大原子核量的杨枝糖质粒载体,可以使用抑菌凝胶渗透性和色谱(SEC)或Sephadex G-25/G-50来分开,然后用散射判断与荧光判断一致查证。相关性解析方法步骤:纪要紫外光-可看得出光谱仪图(CY7 在约740–760 nm 处吸收能力)与荧光光谱仪图(导弹约770–790 nm),并所以测算抗逆性染料/糖的箭头度(DOL);用ESI-MS 或MALDI-TOF 效验氧碳原子量;^1H NMR 和 ^13C NMR(对小氧碳原子片断或之间体)验收物理键导致;解析型HPLC 验收溶解度(>95% 为佳);对含PEG或寡聚糖的化合物,DLS 可的检测水合孔径与单吸附性。若适用肿瘤神经细胞工作,提醒测式水无水磷酸氢、比较稳相关性(各不相同pH、血清具有下的荧光持续)及多巴胺受体整合抗逆性(相互竞争整合或肿瘤神经细胞摄取量耐压试验)。儲存与特别留意应当:预包装阴凉,-20 ℃ 或 4 ℃(短时)保护,悬浊液中需加少量出剂(如 0.01% NaN3 不觉得中用肿瘤细胞实验报告)并避免出现反反复复冻融;人工中单趟阴凉、低温环境的操作可上升劳动生产率与纺织染料安全性。总体设计上,CY7-mannose 的人工照顾了生物制品安全性与生物制品相匹配性,能够 决定比较好的连接方式臂与纯化营销策略,可取得高纯净度、功能性制定的甘霖糖近红外电极,利于后期配体-蛋白激酶共同影响与显像论述。产品名称:CY7-mannose,CY7甘霖糖
含量:95%+特性:膏状或液态物质贮藏条件:-20°C缺水遮光保护封装外形尺寸:50mg 100mg 250mg 500mg(按需给予)生产厂:杏彩体育平台 动物