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CY7.5-Isomaltose,CY7.5标记异麦芽糖的反应步骤
发布时间:2025-09-01     作者:axc   分享到:
CY7.5-Isomaltose,CY7.5标签异麦牙糖的生理反应环节异麦牙糖为α-(1→6)连到的二红提糖,具简单修复系统端,可在该端定向分配偶联以始终保持非修复系统中端地方自动识别功能。CY7.5 为近红外花菁有机会染料(散发约800 nm),与糖原类偶联后在水相中仍具高消光公式和好的光平衡性,不适使用在潜层三维成像、荧光酶联免疫法与表面能建设方案。为加快水阴离子型与减轻非特异离心分离,常选则磺化CY7.5繁衍物。按照“修复系统端改善→无铜载荷点开(SPAAC)/或NHS酯酰胺化”三步法,可才能得到格局确立、配合在一起度(DOL)实时控制的CY7.5-异麦牙糖。终产物大部分呈深蓝紫无水硫酸钠铜,微溶于水、PBS,微量分析有机会助高沸点溶剂(DMSO≤20%)要加速耦联。定性分析以UV-Vis(λ_max≈780–790 nm)、荧光谱图(Em≈800 nm)、MALDI-TOF 或 ESI-MS、HPLC 含量及酚-硫酸钠/PAHBAH 碳水无机化合物酶联免疫法配合测算DOL。遮光、−20 °C无水生活条件灌装保留,规避总是冻融。想法方法流程(以“氨基化→NHS耦联”与“叠氮化→DBCO双击”双路线概述)1)还原故宫场景故宫场景端氨基化(统一前治理 ):异桃子君糖(50 mg)互溶0.1 M 冰醋酸钠降低液(pH 5.5,2–3 mL),注入乙二胺(或2-氨基酒精胺)20–50 eq 与NaBH3CN 10–20 eq;37 °C 振动包夜,实行还原故宫场景故宫场景胺化取到Isomaltose-NH2。用Sephadex G-10/G-25 或超滤膜(3 kDa)脱盐,冻干备品。2A)与CY7.5-NHS偶联(酰胺化路线规划):将Isomaltose-NH2 互溶PBS(pH 7.4,含10–20% DMSO),按糖:染色剂=1:1–1:3摩比,冰浴下速度慢下载CY7.5-NHS(现配,闭光);空调温度反馈2–4 h。以0.1 M 甲醇胺(pH 8.5)封闭式管理残余催化活性酯(15 min)。凝胶的作用层析或分离纯化HPLC纯化,采集主峰,冻干得CY7.5-Isomaltose。2B)叠氮化与无铜弹窗(SPAAC路线图):在过程1开国少将乙二胺替代为2-叠氮乙胺采取回归胺化,得Isomaltose-N3;随即于PBS(pH 7.2,含≤20% DMSO)中放入1–1.5 eq CY7.5-DBCO,闭光温顺混合1–3 h 即得三唑键接入的副产物。3)纯化与定量分析一下:G-25(水/0.1 M NaCl)除盐→分析一下HPLC要根本色度→UV-Vis/荧光测定方法DOL(按A_780 与糖含铁测算)→MS要根本碳原子量分布图制作。小心:分钟遮光;操纵pH(NHS耦联7.2–8.5;抹除胺化约5.5);可挥发助容剂不中毒为了防止颜料自聚;对方DOL所设为≈1,更方便未果参考值与画面自組裝采用。

产品名称:CY7.5-Isomaltose,CY7.5标示异桃子糖

饱和度:95%+相对性状:膏状或介质保存文档情况:-20°C非常干燥遮光保存文档进行包装技术参数:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提高)厂商:杏彩体育平台 生态学

CY7.5-Isomaltose

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