CY7.5-Sodium alginate,CY7.5标记海藻酸钠的反应条件
CY7.5-Sodium alginate,CY7.5标记图片绿豆酸钠的反应迟钝先决条件
CY7.5-Sodium alginate 是通过将近红外荧光染料 Cyanine 7.5(CY7.5)与多糖海藻酸钠(Sodium alginate)分子链上的活性基团进行共价结合得到的荧光修饰多糖。海藻酸钠分子含有大量羧基官能团,而 CY7.5 染料常以 NHS 酯或氨基修饰的形式参与偶联反应,因此反应条件设计的关键在于如何高效地活化多糖羧基或提供合适的偶联基团,使染料能稳定接枝在多糖主链上。
在经典反响中,若选用 CY7.5-NH₂(帶有伯胺基团的衍化物) 与海苔颗粒酸钠偶联,则一般可以先在性情温和标准下纯化多糖份子上的羧基。所用的纯化网络模式为 EDC/NHS(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺/ N-羟基琥铂酰亚胺),EDC 承担责任与羧基行成 O-酰脲纯化中间的的体,随着 NHS 阻止该中间的的体生成二维码更准定的 NHS 酯可溶性基团,得以在 pH 6.0–6.5 的响应水溶剂中实现目标对海苔颗粒酸钠羧基的便捷纯化。此时此刻进入 CY7.5-NH₂ 后,其伯胺基与纯化的 NHS 酯情况酰胺键偶联,终行成安全稳定的 CY7.5-Alginate 共价衍化物。该阶段一般在 水水溶剂或响应网络模式(如 MES 响应液,50 mM) 中实施,以 保障多糖的水解性与反响的效率。另一个种多见方式 是简单实用 CY7.5-NHS 酯 是 活性酶类染剂,其 NHS 酯组成部分可简单与海苔酸钠链上传入的氨基造成酰胺化影响。考虑到海苔酸钠仅带有羧基而紧缺氨基,实践韵达常需用先对海苔酸钠通过氨基化遮盖(譬如传入乙二胺或赖氨酸残基),第三在 pH 7.4–8.5 的 PBS 缓冲器液 中影响,使 NHS 酯与多糖链氨基造成亲核转变成影响。该影响基本上在 恒温或 4 °C 具体条件下遮光通过 2–4 小時,以防止出现 CY7.5 荧光团光降解,一同有效确保高整合率。在不良反应状态的设定上,基本上的要求:摩尔比调控:海带酸钠的单糖单园与 CY7.5 衍化物的摩尔比所设定在 10:1 至 50:1,以应对优化掩盖会导致多糖溶于性和流性质发生变化能的修改。石油醚环镜:CY7.5 对设计石油醚较敏锐,以至于安全体系多采取水相左应;一定要时需加入极富 DMSO 或 DMF(<10%)有所帮助溶解性染色剂。温差与时期间隔:常见在 20–25 °C 前提条件下反應,反應时期间隔 2–12 钟头,长点机会形成副反應扩大。纯化的方式:反馈收场后常用到透析(MWCO 10–50 kDa)或疑胶层析我们要除未反馈的分散活性染料,的清爽的 CY7.5-Sodium alginate。上述情况,CY7.5-Sodium alginate 的自动合成化学想法生活条件管理处是:在柔和的水饱和溶液中再生回收利用 EDC/NHS 碱化羧基或再生回收利用 NHS 酯随便偶联氨基,化学想法步骤中必须要 把控好 pH、体温和摩尔比,以提高认识活性染料淡化生产率与多糖结构的的增强性。产品名称:CY7.5-Sodium alginate,CY7.5标签绿豆酸钠
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