CY7.5-Amyloid β-Peptide，1-42，human，CY7.5-β-淀粉样多肽，1-42的合成路线
CY7.5-Amyloid β-Peptide，1-42，human，CY7.5-β-玉米淀粉样多肽，1-42的合并路径
CY7.5-Aβ(1-42)是将人源β-淀粉样肽Aβ1-42（序列DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA）与近红外花菁染料Cy7.5共轭得到的荧光肽探针。Aβ1-42富疏水并易自聚，近C端包含IIGLMVGGVVIA的跨膜样段，溶解与构象对标记位点高度敏感。Cy7.5在约780–790 nm激发、800–820 nm发射，摩尔消光系数通常≥2×10^5 M⁻¹·cm⁻¹，能在复杂背景中提供低自发荧光干扰的远红外信号。常见单位点标记策略包括：①N端α-氨基与Cy7.5-NHS酯偶联；②在N端前引入柔性接头（β-Ala、AEEA或PEG_n）以降低染料对折叠/聚集的扰动；③在肽序列两端外加Lys(Mtt/ivDde)或Cys作为位点选择性标记手柄。纯化后产物以TFA盐或醋酸盐形式冻干保存，避光、-20 °C干燥条件下稳定。典型表征采用RP-HPLC（C18，梯度洗脱）、MALDI-TOF/ESI-MS确认分子量，UV-Vis/荧光测定染料谱图与标记度（DOL≈0.8–1.0），并以SDS-PAGE或HP-SEC评估聚集与纯度。
制作而成路线图：1）固相制作而成肽链（SPPS）： 用到Fmoc攻略 于Rink amide或Wang硅胶粘合剂上自东东助手至N端日益连通；对含酸性/偏碱位点操作条件侧链保護（Asp/OtBu，Glu/OtBu，Lys(Boc)，His(Trt)，Tyr(tBu)，Ser/Thr(tBu)等）。若计划方案位点特异标记图片，于N端前加β-Ala或AEEA插头，或上限加Lys(Mtt/ivDde)或Cys(Trt)并永久保存正交保護。每步偶联用HBTU/HATU+DIEA或DIC/Oxyma组织体制，难偶联位点可双耦或延长了反映。2）树脂胶裂解与初纯： 用TFA/水/三异丙基硅烷（95:2.5:2.5）裂解2–3 h，冷乙醚悠长岁月中粗肽，RP-HPLC教学过程纯化，得以去保证的Aβ1-42或含正交保证的的前体。3A）NHS酯胺化箭头符号（N端）： 将肽易互溶无水DMSO/水/0.1 M碳酸氢盐加载（pH 8.3）或HEPES（pH 8.2），低密度（≤50 µM）并放入0.01–0.05%去垢剂（如Tween-20）或者量HFIP以抑止聚众；Cy7.5-NHS易互溶DMSO，按1.1–1.5当量中滴加，环境温度遮光发应0.5–2 h。撤销后以RP-HPLC离心分离单箭头符号峰，获得并冻干。3B）Maleimide-巯基暴击伤害（位点特异）： 若产生N端或侧链Cys，先用TCEP平稳重置，pH 6.5–7.0状况下与Cy7.5-Maleimide 1.2当量发应30–60 min，避免出现胺侧发应；其次RP-HPLC纯化。3C）Lys暂时性箭头（正交保障）： 先在饱和溶液中删去Lys(ivDde)（5%肼/DMF一次短洗），任何保障保持良好；自后通过Cy7.5-NHS偶联，来完成后再全去保障/纯化。4）研究方法与原料： 经过MS审核精确度质，UV-Vis计算方式DOL并核实纺织染料谱位移；通过PBS或HBS含0.01%去垢剂、1–5%甘油/白砂糖成膏剂，应对冻融；长期性的背光-20 °C保存。有必要时来进行尺码/涌入如何评价（DLS/SEC-HPLC），保障批间同样性。产品名称：CY7.5-Amyloid β-Peptide，1-42，human
含量：95%+物理性质：固态物或透明液体存放前提条件：-20°C干燥的遮光上传礼品盒外形尺寸：50mg 100mg 250mg 500mg（按需具备）企业：杏彩体育平台 生物体
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