AF750 标记小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物是一种将小麦胚芽凝集素(Wheat Germ Agglutinin, WGA)与近红外荧光染料 Alexa Fluor 750(AF750)共价偶联的高性能分子探针。WGA 是一种来源于小麦胚芽的糖结合蛋白,能够特异性识别细胞表面的 N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和唾液酸残基。AF750 是一种近红外荧光染料,具有较长的激发和发射波长,可提供低背景信号和高组织穿透力,使该探针非常适合于活体成像、多通道荧光实验以及组织学分析。
化学结构与性质
WGA 由多个亚基组成,保留了对糖类的高度选择性和亲和力,能够结合细胞膜上的糖蛋白和唾液酸残基。AF750 是一种近红外荧光染料,其激发峰约在 749–750 nm,发射峰约在 775–780 nm,处于近红外光谱区域。通过 WGA 上的氨基与 AF750 的活性酯(NHS ester)反应,形成稳定共价键,使探针兼具糖结合能力和稳定的近红外荧光信号。AF750–WGA 缀合物通常以冻干粉末形式提供,溶解于 PBS 或去离子水后形成均匀溶液,呈深红色至紫红色,可在常规实验条件下使用,水溶性好,生物相容性高。
细胞膜糖类标记与定位
AF750–WGA 可特异性结合细胞膜上的 GlcNAc 和唾液酸残基,实现细胞膜糖类结构的可视化。在荧光显微镜下,细胞膜及膜连接区域的糖类分布清晰可见,有助于膜结构研究、糖蛋白分布分析及细胞间相互作用研究。
组织学与活体成像
近红外荧光具有良好的组织穿透力和低自体组织背景干扰。AF750–WGA 可用于组织切片染色及活体成像,观察组织中糖类分布及动态变化。在多通道成像实验中,AF750 的近红外信号可与可见光通道的荧光探针兼容,实现多分子共定位分析,适用于肿瘤组织分析、神经组织标记及血管系统研究。
细胞内吞与动态运输研究
由于 WGA 可被细胞内吞,AF750–WGA 可用于追踪细胞内囊泡运输、内吞途径及膜翻转过程。荧光信号随时间和空间变化,为膜动力学、信号传导及细胞代谢研究提供直观数据。
流式细胞分析与高通量实验
在流式细胞术中,AF750–WGA 可用于检测细胞表面糖类结构及分析细胞状态。近红外荧光信号与蓝色、绿色或红色荧光染料兼容,使多参数流式分析和复杂实验设计成为可能。
糖蛋白及分子探针研究
借助 WGA 的糖结合特性,AF750–WGA 可用于糖蛋白识别、分布分析及功能研究。荧光标记便于快速检测糖蛋白及分析其分布和变化,为糖基化研究、受体功能分析及细胞信号传导研究提供可靠工具。