Cy5-Pachymic-Acidlbumin,CY5标记的厚朴酸白蛋白的制备方法
Cy5-Pachymic-Acidlbumin,CY5标上的厚朴酸白蛋清的制作步骤
Cy5 标记的厚朴酸白蛋白(Cy5-Pachymic Acid-Albumin)是一种基于三萜类化合物厚朴酸(Pachymic acid)与大分子载体蛋白白蛋白(Albumin)结合,再经近红外荧光染料 Cy5 修饰而成的多功能复合物。其制备过程涉及产物的修饰、蛋白偶联以及荧光染料标记三个主要步骤。
一方面,厚朴酸一种來出于茯苓的三萜类单质,团伙中有效羧基、羟基等官能团,用于为有机化学表达的锚地位点。只为更加方便与白球淀粉酶依照,厚朴酸常需可以通过滋养操作,如采用 EDC/NHS 模式将其羧基滋养为 NHS 酯,进而具备与球淀粉酶质赖氨酸残基上的氨基现象的力量。该方法流程通畅在弱酸性或一般的中性缓冲区液條件下实现,以切实保障特异性酯的比较稳明确。接下来,将化学活化后的厚朴酸与白淀粉酶做出共价偶联反應。白淀粉酶充当那种平台淀粉酶,碳原子中具有刺激性更多赖氨酸残基,并能与厚朴酸化学活化酯发生的酰胺键连接方式。此反應一般来说在 PBS 储存液或碳酸盐储存液中做出,按照设定摩尔比可调节为节融合的规格。终构成的厚朴酸-白淀粉酶黏结物这样不仅不断提高了厚朴酸的水阴离子型和生物制品用度,还赋予了其优质的血无限循环平稳性。后,采用荧光染色剂 Cy5 的 NHS 酯与白蛋清整合物上的剩下的氨基改变逐步骤突显,改变荧光标签。Cy5 是 近红外荧光染色剂,具备着较弱的荧光抗压强度与优良的光稳定可靠性,标签的反应大部分在碳酸盐缓冲器液(pH 8.3 上下)中改变,以可以淡化酰胺键的变成。凭借透析或抑菌凝胶过滤水等形式快速清理未整合的 Cy5,得到 纯化的 Cy5-Pachymic Acid-Albumin。一个准备的时候的主要源于分阶段纯化与采用性偶联:要抓好厚朴酸有效地偶联到白蛋白酶上,之后在剩下的能用的 氨基位点安于现状行荧光颜料绘制。保持种措施,不仅仅提取了厚朴酸的动物技能,还保持了近红外交互式污染监测。终得出的有机物兼有食用的治疗药物递送与光电技术成相技能,能用的 于食用的治疗药物占比监视、里面成相及药代能量学探析。产品名称:Cy5-Pachymic-Acidlbumin,CY5标出的厚朴酸白核蛋白
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