Cy5-Pachymic-Acidlbumin,CY5标记的厚朴酸白蛋白的制备方法
Cy5-Pachymic-Acidlbumin,CY5标上的厚朴酸白血清的准备技巧
Cy5 标记的厚朴酸白蛋白(Cy5-Pachymic Acid-Albumin)是一种基于三萜类化合物厚朴酸(Pachymic acid)与大分子载体蛋白白蛋白(Albumin)结合,再经近红外荧光染料 Cy5 修饰而成的多功能复合物。其制备过程涉及产物的修饰、蛋白偶联以及荧光染料标记三个主要步骤。
先,厚朴酸不是种起起源于茯苓的三萜类无机化学物质,碳原子中具有羧基、羟基等官能团,适用于为无机化学遮盖的锚定位系统点。为了让于与白血清相结合,厚朴酸常需在产甲烷做处理,如回收利用 EDC/NHS 标准将其羧基产甲烷为 NHS 酯,最终得以应具与血清质赖氨酸残基上的氨基影响的意识。该环节一般性在弱碱或比较适中储存液必备条件下做,以确认活性酶酯的安全强度分析。二、,将滋养后的厚朴酸与白淀粉酶开始共价偶联不良症状。白淀粉酶看做的一种的载体淀粉酶,碳原子中包含的大批赖氨酸残基,是可以与厚朴酸渗透性酯引发酰胺键联系。此不良症状基本在 PBS 储存器液或碳酸盐储存器液中开始,按照管理摩尔比可控节通过的密度计算公式。终生成的厚朴酸-白淀粉酶包覆物不禁从而提高了厚朴酸的水无水磷酸氢和生物工程运用度,还传递其充分的外周血配置动态平衡性。后,展开荧光染色剂 Cy5 的 NHS 酯与白蛋白质复合材料物上的剩下的氨基展开进1步表达,满足荧光记号图片。Cy5 身为近红外荧光染色剂,存在较少的荧光构造与表现出色的光不稳确定性,记号图片发应一样 在碳酸盐缓解液(pH 8.3 左右侧)中展开,以加速酰胺键的确立。能够透析或疑胶过虑等最简单的方法剔除未紧密结合的 Cy5,荣获纯化的 Cy5-Pachymic Acid-Albumin。整体的配制的过程的重要的最为分阶段活性与使用性偶联:一开始确保安全厚朴酸很好的偶联到白核蛋白上,那么在剩下的能作氨基位点上进心行荧光染剂突显。经过这样的对策,不仅仅补齐了厚朴酸的菌物系统,还进行了近红外信息可视化监测数据。终收获的结果具备肿瘤中药递送与磁学成相系统,能作于肿瘤中药布局搜寻、机体成相及药代能源学研究方案。产品名称:Cy5-Pachymic-Acidlbumin,CY5标注的厚朴酸白蛋白酶
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