CY5标示的SE三乙胺盐，CY5-SE triethylamine salt的纯化与研究方法

Cy5-SE三乙胺盐是以花菁染料Cy5为母核、在侧链羧基处引入琥珀酰亚胺活化酯（SE）的胺选择性标记试剂，阴离子染料部分与三乙胺形成有机胺盐，提高固体形态下的流动性与在无水性溶剂中的溶解性。该分子保留Cy5的长波吸收与近红区发射特征，适配常见激发线（633–647 nm），发射位于660–670 nm。SE基团对伯、仲胺具有较高反应选择性，在pH 8.0–8.8缓冲条件下与胺发生亲核取代生成稳定的酰胺键；水相中会随时间水解为非活化的羧酸，因此建议以无水DMSO或DMF制备浓缩母液，临用前滴加至目标体系。该试剂常用于蛋白质、肽、多糖-胺化衍生物、纳米材料表面的胺位点标记；为减少非特异反应，应避免含游离胺的缓冲组分（如Tris、甘氨酸），常用碳酸氢盐、硼酸盐或PBS（配以少量有机相）作为反应介质。典型摩尔投料比为染料：胺位点=3–10:1，室温或低温避光反应0.5–2 h。固体需干燥、避光、低温保存（-20 °C，干燥剂），溶液状态建议一次性分装，减少冻融；三乙胺盐作对离子不影响成键，但在水相纯化时可被交换或去除。

纯化与定量分析不良反应后纯化：血清/大脂溶性偶联物：最优运用疑胶滤过或脱盐柱（如G-25/G-50或10 kDa超滤膜）取除氧化钙含量有机染料与小脂溶性副物品；也可以选择长宽排阻层析推动缓解换洗。如需较高含量，更易用亚铁离子更换或弱疏水色谱做进几步磨光。小原子偶联物：分享反相剥离纯化HPLC（C18，水/乙腈等度，挥发掉性酸作亚铁铁离子对，如0.1%甲酸）；解离Cy5与目标值生成物提取精力有着很深差别的，尽可能使剥离。必需时实现对亚铁铁离子相互交换以到想要盐型。膏状纺织染料物料的纯化与太干：镶嵌后依据反相或正相柱层析快速清理未影响当中体与NHS副有机物，宣泄除有机溶剂后在蒸空下于室内温度太干，放入阴凉容器类。任务含量一般而言以HPLC（650 nm污染监测）达≥95%为合适规范标准。结构的与类型表现：• UV-Vis：在甲醇或PBS中测量获取光谱仪，Cy5主获取峰约646–650 nm，肩峰与短波带使用分辨色度与聚集地习惯。• 荧光：散发峰约662–670 nm，量子劳动生产率受有机溶剂与环保危害；球蛋白偶联后好察到细微位移或挠度的变化，中用评价微环保调节作用。• 质谱：材质染剂表明含SE的碳原子阴阳离子峰；偶联物品提升的质理相等于“Cy5染剂骨架去NHS后的质理”与底物胺组成酰胺后的增加。对大碳原子也可以LC-MS（脱盐）或高辩认MS定性分析小碳原子偶联物。• HPLC/UPLC：多激发光谱检查（260/280/650 nm），方向峰单一化的且保持耗时安全；峰空间归一化用到估算溶解度与徘徊颜料杂质。• IR：SE羰基带与酰胺I/II带使用区分开碱化酯与成键后副产物；碱化酯电离将导致羧酸症状降解。• NMR（选用以小分子式）：在DMSO-d6或CD3OD中关察花菁骨架与丁二酰亚胺特征英文的数据；偶联后NHS有关系的数据看不见。• 蛋清质偶联DOL（标志度）：按DOL = (A650/εCy5)/(A280/ε蛋清质 − CF×A650/ε蛋清质)推算，CF为Cy5对A280的校零弹性系数（技术值约0.05–0.08，按批售商数据源测量）。• 标准比较稳确定：监测站pH 8.3下SE蛋白质水解推磁学，网站优化上料先后顺序与体现天数；利用立即间的HPLC与消除波动分析评估比较稳确定。

产品名称：CY5符号的SE三乙胺盐

溶解度：95%+相对性状：无水硫酸铜或液态储放的条件：-20°C干燥的阴凉上传再生型号：50mg  100mg  250mg  500mg（按需作为）生产厂：杏彩体育平台 生物体

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